消化道恶性肿瘤（包括食管癌、胃癌、结直肠癌等）是全球常见的恶性肿瘤类型，其预后与肿瘤侵袭深度及转移情况密切相关
[1]。腹膜转移作为最常见的远处转移形式之一，通常提示肿瘤已突破肠壁浆膜层，属于晚期阶段，患者对常规化疗反应差，5年生存率不足10%
[2]。然而，传统影像学检查（如增强CT、MRI）对早期微小腹膜转移灶（<5 mm）的检出率低，漏诊率高达30%~50%
[3]。
肿瘤标志物（如CA125、CA19-9、CEA）因操作简便、成本低，在消化道肿瘤筛查及疗效监测中广泛应用。其中，CA125是一种跨膜糖蛋白，在卵巢癌、胰腺癌及消化道肿瘤中高表达，其水平与肿瘤负荷呈正相关
[4]；CA19-9是胰腺癌的首选标志物，但在胃癌、结直肠癌中也有一定诊断价值
[5]；CEA作为胚胎类抗原，常见于消化道肿瘤，但特异度较低
[6]。然而，单一标志物的敏感度或特异度有限，联合检测可提高诊断效能
[7]。
近年来，液体活检技术，如循环肿瘤DNA（ctDNA）因能动态反映肿瘤基因组特征，在癌症早期诊断、预后评估中展现出潜力
[8]。腹腔灌洗液ctDNA来源于腹膜转移灶的脱落细胞，其浓度较血液高100倍以上，可检测到传统影像学无法识别的微小转移灶
[9]。本研究通过整合传统肿瘤标志物与ctDNA检测，探讨二者联合在消化道恶性肿瘤腹膜转移中的诊断价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
回顾性收集2019年9月—2024年9月期间湖南省长沙市第一医院收治的180例消化道恶性肿瘤患者资料。纳入标准：(1) 经腹部CT结合手术病理确诊为消化道恶性肿瘤（直肠癌、食管癌、胃癌、结肠癌）；(2) 患者Karnofsky评分≥60；(3) 均接受手术治疗，尚未接受放化疗；(4) 入组患者均为病理分期Ⅱa~Ⅳa期患者。排除标准：(1) 伴有其他心、肝、肺、肾等重要器官疾病；(2) 肝、肺、骨等远处转移；(3) 伴有自主功能障碍患者。180例消化道恶性肿瘤患者中，120例发生腹膜转移（符合以下任意一条诊断标准：(1) 增强CT显示腹膜结节或强化病灶；(2) 腹腔镜探查发现腹膜≥5个粟粒样结节；(3) 腹腔灌洗液细胞学或ctDNA检测阳性
[10]）；60例未发生腹膜转移（经腹部CT结合手术病理确认无腹膜转移，且排除肝、肺等远处转移）。腹膜转移组患者中，男78例，女42例；年龄30~65岁，平均（42±5.8）岁；肿瘤类型：直肠癌46例，食管癌32例，胃癌26例，结肠癌16例。无腹膜转移组患者中，男38例，女22例；年龄30~60岁，平均年龄（40±5.11）岁；肿瘤类型：直肠癌26例，食管癌17例，胃癌10例，结肠癌7例。两组年龄、性别、原发部位等基线资料均衡（均
P>0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，并豁免患者知情同意。
1.2 试剂
人CA125 ELISA（货号：SP10411）、人CA19-9 ELISA试剂盒（货号：SP10409）、CEA ELISA试剂盒（货号：SP10413）购于武汉塞培生物科技有限公司；血清分离胶管（货号：367955）购于济南千司生物技术有限公司。ctDNA检测在华大基因公司完成。
1.3 方法
1.3.1 血清肿瘤标志物检测
使用全自动化学发光免疫分析仪（ARCHITECT i4000sr型，美国雅培公司）及配套试剂，空腹采集静脉血2 mL，4 ℃下3 000 r/min离心10 min，分离血清后-20 ℃保存。采用化学发光法检测CA125、CA19-9、CEA，严格按照仪器及以上检测项目的标准操作规程进行操作，室内质量控制均在控。参考范围：CEA<5 ng/mL，CA19-9<31.1 U/mL，CA125<35 U/mL，ctDNA≥2 ng/mL。
1.3.2 腹腔灌洗液ctDNA检测
术中或超声引导下采集腹腔灌洗液250 mL，5 000 r/min离心10 min分离上清液，加入蛋白酶K（20 mg/mL）及SDS（20%）裂解30 min，磁珠法提取ctDNA。通过定制化NGS panel（覆盖TP53、KRAS、PIK3CA等基因）进行测序，平均测序深度≥5 000×。筛选体细胞突变（等位基因频率VAF≥0.1%），并定量ctDNA浓度（ng/mL）。
1.4 统计学处理
采用SPSS 25.0软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数（百分比）[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验。诊断效能评估采用ROC曲线，计算AUC值及95%置信区间（CI）。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 两组血清肿瘤标志物水平比较
腹膜转移组血清CA125、CA19-9、CEA水平均明显高于对照组（
P<0.000 1）（
表1）。
2.2 两组血清肿瘤标志物阳性率比较
腹膜转移组CA125、CA19-9、CEA阳性率分别为62.50%、69.17%、44.17%，三项联合阳性率为85.00%；无腹膜转移组CA125、CA19-9、CEA阳性率分别为48.33%、51.67%、36.67%，三项联合阳性率为68.33%，两组间各项阳性率差异均有统计学意义（均
P<0.000 1）（
表2）。
2.3 诊断效能分析
ROC曲线分析显示，CA125的AUC值最高（0.925），敏感度86.45%、特异度87.22%；三项肿瘤标志物联合检测的AUC值为0.925；联合ctDNA检测后，AUC值提升至0.942（95%
CI=0.912~0.972），敏感度92.5%、特异度88.3%（
表3）。
3 讨 论
本研究中，CA125的诊断效能最高（AUC=0.925），这可能与其糖基化修饰特性相关，CA125在消化道恶性肿瘤腹膜转移患者中表达显著升高，且随肿瘤负荷增加而上升，肿瘤切除或缩小后浓度下降
[11]。联合CA19-9、CEA可弥补单一指标的不足：CA19-9虽敏感度较低，但对胰腺癌等腺癌更具特异性；CEA作为广谱标志物，可辅助评估肿瘤进展
[12]。腹膜转移组三项联合检测的阳性率（85.00%）显著高于单项指标，与既往研究一致
[13-15]。
腹腔灌洗液ctDNA浓度显著高于血液，可识别影像学漏诊的微小转移灶（<5 mm）
[9]。本研究中，联合ctDNA后AUC值提升至0.942，表明ctDNA与传统标志物具有互补性。相较血清癌胚抗原水平检测，将ctDNA测序加入结直肠癌筛查手段中能显著提高检测敏感度和特异度
[16]。此外，有报道对胃食管结合部腺癌进行血浆ctDNA检测，能够有效检测ctDNA的多种基因变异，反映时空分子异质性，且
HER2和
EGFR扩增患者均显示出显著的生存优势，在胃食管结合部腺癌中的临床决策起到评估和指导作用
[17]。
一项结肠癌的Ⅲ期研究
[18]显示手术和辅助化疗后的ctDNA检测结果与患者的疗效有关，术后ctDNA阳性，伴随更短的无进展生存期，化疗完成后ctDNA阳性患者的3年无进展生存率为30%，ctDNA阴性患者的3年无进展生存率为77%，进一步支持ctDNA在动态监测中的价值。
综上所述，血清CA125、CA19-9、CEA联合腹腔灌洗液ctDNA检测可显著提高消化道恶性肿瘤腹膜转移的诊断敏感度与特异度，同时通过ctDNA分子分型为个体化治疗提供依据，是一种精准、高效的诊断策略，具有深远的临床意义和广阔的发展前景。但由于基因检测费用较高，故检测的样本数量较少，使得本研究存在一定的不足之处，今后有待大规模的样本支持，进行消化道恶性肿瘤腹膜转移的前瞻性研究。此外，ctDNA存在一定的假阴性率，可能与腹膜转移灶释放不足或检测阈值（如ctDNA≥2 ng/mL）设置有关，需优化检测方法，下一步研究将纳入ctDNA动态监测中的结果，以及循环肿瘤细胞（CTC）或外泌体miRNA等多组学数据，未来可构建更全面的预测模型。
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