胃癌是全球发病率与病死率均居前列的恶性肿瘤
[1-2]。根治术联合辅助治疗可提升早期患者生存率，但术后复发转移仍是影响预后的关键因素
[3]。目前临床预后评估依赖病理分期、淋巴结转移等传统指标，存在静态性与滞后性，难以反映肿瘤生物学异质性
[4-5]，亟需无创、稳定、可定量的新型血清标志物。
细胞髓细胞瘤原癌基因（myelocytomatosis oncogene，c-Myc）为经典原癌基因转录因子，可随肿瘤细胞增殖、凋亡释放入血，血清中可稳定检出，其水平与肿瘤负荷、恶性程度及预后密切相关，多项研究证实血清c-Myc蛋白可经酶联免疫吸附法测定（ELISA）
[6-9]。与PCR检测mRNA相比，ELISA直接测定功能性蛋白，更能反映体内生物学活性，操作简便、适合临床应用，因此本研究选用ELISA检测血清c-Myc。GINS复合体亚基4（GINS complex subunit 4，GINS4）是DNA复制关键调控因子，参与维持基因组稳定性，异常高表达可驱动肿瘤恶性增殖与侵袭
[10]。研究证实GINS4蛋白可释放入血并稳定存在，血清中可经ELISA准确定量。PCR仅能检测游离mRNA，易降解、稳定性差，无法反映蛋白功能状态，故本研究同样采用ELISA检测血清GINS4
[11-12]。c-Myc通过调控细胞周期、代谢重编程及上皮-间充质转化驱动胃癌进展，GINS4通过异常激活DNA复制、加剧基因组不稳定性促进肿瘤转移。二者从癌基因激活与DNA复制紊乱通路协同促癌，血清蛋白均可经ELISA稳定检测，联合检测可提升预后预测效能，为胃癌根治术后风险分层、个体化治疗与动态监测提供新型无创标志物组合。
1 资料与方法
1.1 一般资料
回顾性纳入2019年1月—2022年1月于山东第二医科大学附属济南市第四人民医院胃肠外科行胃癌根治术的患者180例（胃癌组），同时选取同期50名年龄及性别相匹配的健康体检者作为对照组。纳入标准：⑴ 已行根治性胃切除术，且术后病理确诊为原发性胃癌；⑵ 术前未接受放疗、化疗或靶向治疗；⑶ TNM分期Ⅲ期的患者均为M0期，Ⅳ期患者为寡转移/潜在可切除转移灶患者，经转化治疗降期后评估可行R0切除，符合胃癌外科诊疗规范；⑷ 临床病理资料可追溯，术前血清样本保存完整；⑸ 术后规律随访36个月或至死亡。排除标准：⑴ 合并其他恶性肿瘤、血液系统疾病或严重心、肝、肾等重要脏器功能障碍；⑵ 术后30 d内因手术并发症死亡；⑶ 妊娠或哺乳期。本研究已获山东第二医科大学附属济南市第四人民医院伦理委员会批准，并豁免知情同意。
1.2 方法
1.2.1 血清检测
胃癌组患者于术前1 d清晨空腹采集肘静脉血5 mL，对照组于体检时清晨空腹采集肘静脉血5 mL。将血液标本置于37 ℃恒温箱中静置30 min，3 000 r/min离心10 min后分装保存于-80 ℃冰箱中待检。采用双抗体夹心ELISA血清c-Myc及GINS4水平，严格按说明书操作。每样本设双复孔，取均值作为最终浓度。实验室内质控样本变异系数均<8%，批间差异<10%。离心机（Beckman Coulter，型号：Avanti J-26S）、c-Myc酶联免疫试剂盒（武汉Elabscience，批号：20250201）、GINS4酶联免疫试剂盒（武汉Boster Bio，批号：241215）。
1.2.2 分组
根据对照组检测结果计算参考区间：c-Myc（3.20±0.92）ng/mL，GINS4（5.13±1.40）ng/mL。以均数加2个标准差为临界值
[13]（c-Myc：5.04 ng/mL，GINS4：7.93 ng/mL），将患者分为双高表达组（c-Myc与GINS4均≥临界值，
n=43）、单一高表达组（c-Myc或GINS4≥临界值，
n=86）和双低表达组（c-Myc与GINS4均<临界值，
n=51）。之后根据随访3年内患者存活情况，分为存活组和死亡组两个亚组。
1.2.3 基线资料收集
通过山东第二医科大学附属济南市第四人民医院病案系统收集患者的临床资料，包括患者性别、年龄、肿瘤部位及直径、浸润深度、病理类型、分化程度、TNM分期、淋巴结转移与否以及血清c-Myc、GINS4水平。
1.2.4 随访及结局指标
术后每3个月进行1次随访（通过门诊复查或电话等方式），主要终点为总生存期，定义为从手术日至全因死亡的时间；未发生死亡事件的受试者，生存时间截尾至末次随访日期（随访截至2025年1月）。
1.3 统计学处理
采用SPSS 25.0行数据分析，计数资料以例数（百分比）[n（%）]，行χ2检验，计量资料均符合正态性分布，以均数±标准差（）表示，行独立样本t检验；累积生存率通过Kaplan-Meier生存曲线描述；运用多因素Cox比例风险回归模型筛选胃癌根治术患者预后的独立风险因素；受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析c-Myc、GINS4的预测效能，采用DeLong检验比较ROC曲线差异。检验水准P<0.05。
2 结 果
2.1 血清c-Myc、GINS4水平比较
与对照组比较，胃癌患者血清c-Myc水平（7.36±2.10）ng/mL vs.（3.20±0.92）ng/mL，t=13.632，P<0.001和GINS4水平（12.66±3.81）ng/mL vs.（5.13±1.40）ng/mL，t=13.702，P<0.001均明显升高。
2.2 生存分析
截至随访结束，180例胃癌患者的3年生存率为58.3%。双高表达组（
n=43）中位生存期为24个月（95%
CI=18~36），3年生存率为25.58%，单一高表达组（
n=86）中位生存期为30个月（95%
CI=26~36），3年生存率为58.14%，双低表达组（
n=51）中位生存期未达到，3年生存率为86.27%，双高表达组的3年生存率明显低于后两组（Log-rank
χ2=28.74，
P<0.001）（
图1）。
2.3 影响胃癌根治术预后的单因素分析
存活组与死亡组在性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、浸润深度、病理类型及分化程度方面，差异无统计学意义（均
P>0.05），死亡组TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及淋巴结转移人数，以及血清c-Myc和GINS4水平均显著高于存活组（
P<0.05）（
表1）。
2.4 胃癌根治术预后的Cox比例风险回归分析
将存活组与死亡组存在统计学差异的指标（TNM分期、淋巴结转移、c-Myc、GINS4）作为自变量，以总生存时间及结局状态为因变量建立Cox比例风险回归模型，进行Cox回归分析，结果显示，TNM分期、c-Myc、GINS4为影响胃癌根治术预后的独立影响因素（均
P<0.05）（
表2）。
2.5 c-Myc、GINS4联合检测对胃癌根治术预后的预测价值
ROC曲线显示，TNM分期、c-Myc、GINS4联合预测胃癌根治术预后的曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.875（95%
CI=0.769~0.935），明显优于单一指标（TNM分期：AUC=0.743；c-Myc：AUC=0.782；GINS4：AUC=0.765），差异均有统计学意义（均
P<0.05）（
表3）（
图2）。
3 讨 论
c-Myc为经典促癌转录因子，可促进胃癌细胞增殖、侵袭与转移；GINS4参与DNA复制，调控肿瘤恶性增殖，二者在胃癌中异常高表达，均与不良预后相关，且作用机制互补
[14-16]。因此本研究选取此二者进行研究，本研究初步探讨了血清c-Myc与GINS4联合检测对胃癌根治术患者预后的预测价值，研究结果不仅证实了二者作为新型预后标志物的临床潜力，也为探索胃癌发生发展机制提供了新视角。
血清c-Myc和GINS4分别作为驱动细胞增殖的转录因子与介导DNA复制的关键蛋白，其水平升高在生物学上协同反映了肿瘤强烈的侵袭性
[17-18]。c-Myc为经典原癌基因，主要通过调控细胞周期进程、代谢重编程及上皮-间充质转化，促进胃癌细胞增殖、侵袭与化疗耐药，其异常高表达可驱动肿瘤恶性进展并缩短患者生存期
[19]。GINS4是DNA复制核心调控亚基，通过维持复制叉稳定参与基因组稳定性调控，其过表达可引发基因组不稳定、加速细胞分裂并增强转移潜能，与肿瘤进展及不良预后直接相关
[20]。二者在肿瘤细胞内高表达后可释放至外周血，因此血清中可稳定检出，具备无创检测的生物学基础。本研究发现，在胃癌根治术后患者中，死亡组的血清c-Myc与GINS4水平均显著高于存活组，且高表达与更晚的TNM分期、更高的淋巴结转移率显著相关。这提示，联合检测这两个标志物，能够从增殖驱动与执行两个层面，无创地评估肿瘤的恶性潜能，为在传统病理分期之外，进行预后风险分层和个体化管理提供了有价值的分子依据。从分子生物学机制来看，c-Myc作为原癌基因，通过调控细胞周期、增殖、凋亡及代谢等关键过程驱动肿瘤进展
[21]。在胃癌中，c-Myc的异常激活可促进肿瘤细胞的侵袭转移，并与化疗耐药密切相关
[22]。本研究发现，胃癌患者血清c-Myc水平显著高于健康人群，且双高表达组患者生存期明显缩短，这与既往组织学研究中c-Myc过表达与不良预后的结论一致
[23]。而GINS4作为DNA复制起始复合物GINS的核心亚基，其主要功能是通过参与DNA复制叉的推进，维持基因组稳定性
[24-25]。近年来研究
[26-27]表明，GINS4在多种恶性肿瘤中呈现异常高表达，其过表达可加速肿瘤细胞增殖，并与上皮-间充质转化进程相关，从而促进肿瘤转移。本研究中，GINS4高表达同样与胃癌患者不良预后显著相关，提示其在胃癌恶性生物学行为中扮演重要角色。二者协同作用可能通过调控细胞周期与DNA复制，共同促进胃癌的侵袭转移，最终影响患者预后。本研究中肿瘤分化程度对胃癌患者3年生存差异无统计学意义，可能与以下因素有关：本研究为单中心回顾性研究，样本量有限，低分化亚组偏少，统计效能不足；术后辅助化疗可能削弱分化程度对预后的影响；病理取材存在抽样偏倚，难以完全体现肿瘤的空间异质性，难以反映肿瘤整体异质性。后续将扩大样本量进一步验证。
从临床应用价值分析，本研究构建的联合检测模型展现出较高的预测效能。传统临床病理指标如TNM分期虽仍是预后评估的金标准，但存在局限性，难以完全反映个体生物学差异
[28-30]。而血清c-Myc与GINS4联合检测的AUC达到0.875，显著优于单一指标检测，提示该组合有望作为现有临床评估体系的重要补充。此外，血清学检测具有简便、可重复的优势，适合术后长期随访监测，通过动态检测二者水平变化，有助于早期识别复发高危人群，及时调整治疗策略。例如，对于双高表达患者，可能需强化术后辅助治疗强度或缩短随访间隔，从而实现精准化管理。与同类研究相比，本研究存在一定创新与优势。首先，多数既往研究聚焦于组织样本中c-Myc或GINS4的表达，而本研究首次探索其血清学水平的临床意义，为液体活检在胃癌预后评估中的应用提供了新方向；其次，通过构建联合预测模型，克服了单一标志物敏感度和特异度不足的问题，提高了预测准确率。本研究存在诸多局限性：其一，为单中心回顾性研究，样本量有限，可能存在选择偏倚，仅检测术前单次血清c-Myc、GINS4水平，未行术后动态监测，无法明确二者动态变化与肿瘤复发转移的关联；其二，未深入探索c-Myc与GINS4在胃癌中的上下游调控机制，也未单独设立二者单独高表达亚组，难以区分单一指标与联合检测的预测效能差异；其三，未采用时间依赖性ROC、时间依存Cox模型分析，可能低估预后预测效能，且未统一记录并分层分析患者术后辅助化疗情况，可能干扰二者预后独立预测价值的评估；其四，采用血清样本检测，虽具有无创、可重复优势，但受全身代谢等因素干扰，其与肿瘤原位表达量的相关性仍需验证，且未评估联合检测模型在不同胃癌病理亚型中的预测效能差异。此外，虽证实二者为独立预后因素，但其临床靶向治疗价值仍需进一步探索。未来需通过多中心、大样本前瞻性研究及基础实验完善相关研究。
综上所述，血清c-Myc与GINS4联合检测初步显示出作为胃癌根治术后无创预后标志物的潜力，但其临床推广仍需前瞻性研究验证血清与组织表达的一致性、确立最佳临界截断值，并开展成本-效益分析。现阶段应视为研究性工具，而非临床决策的独立依据。后续研究需进一步扩大样本量、明确分子机制，并探索其在指导治疗决策中的具体应用模式。
山东省医药卫生科技发展计划基金资助项目(202104010373)
京公网安备11010202008535号
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