过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型的影响及其机制

黄仲辰, 陈晓菊, 姚意恩, 李超乾

doi:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.01.002

广西医科大学学报 ›› 2022, Vol. 39 ›› Issue (01) : 7 -12. DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.01.002

过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型的影响及其机制

黄仲辰, 陈晓菊, 姚意恩, 李超乾

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摘要

目的：探讨过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型的影响及其机制。方法：制备TCR-β-/-小鼠分别经生理盐水和母牛分枝杆菌雾化后γδT细胞悬浮液；将32只无特定病原体（SPF）级雄性Balb/c小鼠随机均分为A组、B组、C组、D组，A组为阴性对照组，B组为哮喘模型对照组，C组为过继经生理盐水雾化后的γδT细胞对照组，D组为过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞预防组；B组、C组、D组均用鸡卵清蛋白（OVA）常规制备哮喘模型，C组、D组都在第1次腹腔注射OVA前10 min及第1次雾化OVA激发前10 min经鼠尾静脉分别注射1×106个γδT细胞；A组腹腔注射及雾化均用PBS代替；末次雾化后24 h内检测气道反应性，处死小鼠，行支气管肺泡灌洗收集肺泡灌洗液（BALF），酶联免疫吸附测定实验（ELISA）检测BALF的IL-13和IL-5的水平，取肺组织做苏木精—伊红（HE）和过碘酸—雪夫（PAS）染色，免疫组织化学实验检测肺组织中T-bet/GATA3蛋白的表达。结果：B组小鼠气道反应性高于A组、D组（P<0.05）,D组小鼠气道反应性低于B组（P<0.05）,C组小鼠气道反应性相比B组变化不明显；相对比于B组、C组，D组支气管周围炎症细胞浸润减少，D组管腔中杯状细胞较B组、C组减少；B、C组中肺组织的IL-13、IL-5表达高于A、D组（P<0.05）;B组、C组肺组织的GATA3表达明显高于A组、D组（P<0.05）,T-bet表达低于A、D组（P<0.05）。结论：过继经母牛分枝杆菌雾化免疫后的γδT细胞对哮喘小鼠模型具有预防作用，可能与分别上调或下调T-bet、GATA-3水平，以及调节IL-13、IL-5分泌有关。