过表达/干扰表达mi R-122对HBV稳转优势单克隆株HepGA14表达功能的影响

摘要

目的：采用miR-122过表达/干扰表达慢病毒质粒干预HBV稳转优势单克隆株HepGA14，观察其乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝病毒DNA(HBV DNA)表达功能的变化。方法：构建miR-122过表达和干扰表达慢病毒质粒，以最佳感染复数MOI值侵染HBV全基因组1.3倍体HBV稳转优势单克隆株HepGA14（对照组），分别命名为HepGA14-VL1044(miR122过表达组)和HepGA14-VL1043(miR122干扰组)。qPCR检测HepG2和HepGA14中的中miR-122的表达情况。ELISA分别检测3组细胞中上清HBsAg和HBeAg表达量，qPCR检测3组细胞的HBV DNA和miR-122表达水平。结果：最佳MOI值为30。与对照组比较，过表达miR-122慢病毒质粒侵染HepGA14后可上调优势细胞株内miR-122表达量，下调HBV DNA复制活性及HBsAg、HBeAg的表达量；干扰miR-122表达后，可上调HepGA14的HBV DNA复制活性及HBsAg、HBeAg的表达量，差异均有统计学意义（均P<0.000 1）。结论：成功构建miR-122慢病毒过表达/干扰载体，并建立稳定过表达/干扰miR-122的HepGA14细胞系；miR-122可调控HBsAg、HBeAg、HBV-DNA的表达水平。

关键词

微小RNA-122 / 乙型肝炎病毒 / 乙肝标志物 / 稳转 / 优势单克隆株