七叶亭对高糖诱导的视网膜色素上皮细胞HIF-1α/BNIP3通路介导自噬的影响

摘要

目的：探讨七叶亭对高糖诱导的视网膜色素上皮（RPE）细胞损伤的影响及其与缺氧诱导因子1α（HIF-1α）/E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)通路介导的自噬的作用关系。方法：体外培养人RPE细胞系ARPE-19，高糖进行诱导，并对其用不同浓度（1.0μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L）七叶亭处理，将细胞分为对照组、高糖组、七叶亭（1μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L）组，七叶亭+2ME2(5.0μmol/L七叶亭+1.0μmol/L的HIF-1α/BNIP3通路抑制剂2ME2)组。细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞活力；2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）法检测ROS含量；酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6(IL-6)的水平；透射电子显微镜检测细胞自噬；蛋白免疫印迹（WB）法检测HIF-1α/BNIP3通路蛋白、增殖蛋白β-catenin及自噬蛋白Beclin1、LC3的表达。结果：与对照组比较，高糖组ROS含量、TNF-α、IL-6水平、蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及蛋白HIF-1α、BNIP3表达升高，细胞活性、蛋白β-catenin表达降低（P<0.05）；与高糖组比较，七叶亭处理组细胞活性、蛋白β-catenin、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及蛋白HIF-1α、BNIP3表达升高，细胞ROS含量、TNF-α、IL-6水平降低（P<0.05），且呈剂量依赖；与5μmol/L七叶亭组比较，七叶亭+2ME2组上述指标水平均得到逆转。结论：七叶亭可能通过激活HIF-1α/BNIP3介导的自噬降低高糖诱导的氧化应激造成的ARPE-19细胞损伤。

关键词

七叶亭 / 高糖 / 视网膜色素上皮细胞 / 缺氧诱导因子1α/E1B-19kDa相互作用蛋白3 / 自噬