16q缺失调节miR-3145-5p/CYP2E1表达对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡及患者预后的影响

摘要

目的：探讨人16号染色体长臂（16q）缺失相关差异表达基因（DEGs）和miRNAs(DEmiRs)对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡及肝细胞癌（HCC）患者预后的影响及其机制。方法：从肿瘤与癌症基因组图谱（TCGA）数据库的HCC数据集中获取全转录组数据和拷贝数变异（CNV）数据，就16q缺失对数据集进行DEGs和DEmiRs筛选；从Kaplan-Meier Plotter数据库中获取DEGs对患者生存影响图谱；通过miRWalk网站预测DEGs表达调节相关的miRNAs。构建miRNA mimic慢病毒载体转染Huh7细胞，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测DEmiRs(miR-3145-5p)、DEGs(CYP2E1)的表达，分别采用CCK-8、细胞克隆形成实验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和流式细胞术检测细胞增殖、侵袭、迁移、细胞周期和凋亡。结果：从数据集中筛选出与16q缺失相关的8个miRNAs和12个关键DEGs；根据miRWalk网站预测和分析结果，选择miR-3145-5p与CYP2E1进行后续实验验证。与NC-con294组比较，miR-3145-5p mimic组miR-3145-5p表达和细胞凋亡率升高，CYP2E1蛋白表达水平降低，细胞增殖和侵袭能力增强（均P<0.01），两组各周期细胞所占百分比和细胞迁移能力比较无明显差异（P>0.05）。结论：16q缺失可能通过上调miR-3145-5p靶向下调CYP2E1表达来促进HCC细胞的增殖和侵袭而进一步增加细胞的恶性表型，其将来可作为16q缺失亚型HCC的潜在治疗靶标，为HCC的诊断与治疗提供新的依据。

关键词

16q缺失 / 拷贝数变异 / miR-3145-5p / CYP2E1 / 肝细胞癌 / 预后