依托咪酯对缺氧复氧诱导心肌细胞炎性损伤及HMGB1/RAGE/NF-κB通路的影响

摘要

目的：探讨麻醉诱导剂依托咪酯（Eto）在缺氧/复氧（H/R）后心肌细胞炎性损伤中的作用及其对高迁移率族蛋白B1/晚期糖基化终末产物受体/核因子κB(HMGB1/RAGE/NF-κB)通路的影响和机制。方法：随机将大鼠H9C2心肌细胞分成对照组、H/R组、Eto-L组（2 mg/L Eto预处理）、Eto-H组（4 mg/L Eto预处理）、正丁酸钠组（10 mmol/L HMGB1抑制剂正丁酸钠100μL）、Eto-H+正丁酸钠组；通过缺氧7 h后复氧2 h建立H/R心肌细胞模型，于造模前在Eto-L组、Eto-H组、正丁酸钠组及Eto-H+正丁酸钠组中分别添加相应药物处理48 h，而对照组、H/R组细胞常规培养；检测细胞上清液白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素6(IL-6)水平及乳酸脱氢酶（LDH）漏出率；分别通过苏木精-伊红（HE）染色、MTT法、流式细胞仪、比色法观察H9C2细胞形态、活力、凋亡、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性；Western blotting检测caspase-3及HMGB1/RAGE/NF-κB通路蛋白表达。结果：与对照组比较，H/R组细胞上清液中IL-1β、TNF-α及IL-6水平、LDH漏出率、细胞病理程度、凋亡率、caspase-3活性及其蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65、RAGE、HMGB1表达水平增加，而细胞存活率降低（P<0.05）；与H/R组比较，Eto-L组、Eto-H组、正丁酸钠组细胞上清液IL-1β、TNF-α及IL-6水平、LDH漏出率、细胞病理程度、凋亡率、caspase-3活性及其蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65、RAGE、HMGB1表达水平减少，而细胞存活率增加（P<0.05），且Eto-L组、Eto-H组间上述指标比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与Eto-H组比较，Eto-H+正丁酸钠组细胞上清液IL-1β、TNF-α及IL-6水平、LDH漏出率、细胞病理程度、凋亡率、caspase-3活性及其蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65、RAGE、HMGB1表达水平减少，而细胞存活率增加（P<0.05）。结论：Eto可以抑制H/R心肌细胞损伤，其机制可能是通过抑制HMGB1/RAGE/NF-κB通路和下调促炎性细胞因子的表达来实现。

关键词

依托咪酯 / 缺氧/复氧 / 炎性损伤 / 晚期糖基化终末产物受体 / 高迁移率族蛋白B1 / 核因子κB / 心肌细胞

基金资助

海南省卫生计生行业科研项目（No.15A200003）