METTL3/miR-126调控TGF-β1/smad2对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖的影响

张静; 张洁; 莫颖; 张蕾; 孙明慧

doi:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.019

广西医科大学学报 ›› 2022, Vol. 39 ›› Issue (03) : 456 -461. DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.03.019

METTL3/miR-126调控TGF-β1/smad2对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖的影响

张静, 张洁, 莫颖, 张蕾, 孙明慧

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摘要

目的：探讨类甲基化转移酶3(METTL3)/miR-126对高糖（HG）诱导的大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）增殖的影响及其作用机制。方法：将NRK-52E细胞分为对照组（5.5 mmol/L葡萄糖）、HG组（35 mmol/L葡萄糖）、HG+siRNA-NC组和HG+METTL3 siRNA组。采用MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞上清液中转化生长因子（TGF）-β1蛋白含量，RT-qPCR法检测miR-126和METTL3基因表达，western blotting检测METTL3和smad2蛋白表达，RNA免疫共沉淀技术（RIP）检测METTL3与miR-126的结合情况。结果：与对照组比较，HG组细胞增殖率和G1期细胞所占百分比降低，G2期细胞所占百分比及METTL3、TGF-β1、smad2、miR-126表达升高（P<0.05）；与HG组比较，HG+METTL3 siRNA组细胞增殖率升高，G1期细胞所占百分比降低，S期细胞所占百分比升高，METTL3、TGF-β1、smad2、miR-126表达降低（均P<0.05）。HG组与HG+siRNA-NC组各指标比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。RIP实验结果显示，METTL3siRNA可降低成熟miR-126的含量（P<0.05）。结论：METTL3在HG诱导的肾小管上皮细胞中的表达上调，抑制细胞增殖，其可能与甲基化修饰miR-126并激活TGF-β1/smad2信号通路有关。