曲美他嗪对大鼠骨关节炎炎症反应和软骨基质降解的作用研究

摘要

目的：探讨曲美他嗪对大鼠骨关节炎（OA）炎症反应和软骨基质降解作用。方法：将软骨细胞分为对照组、模型组和实验组。对照组加入单纯培养基培养，模型组加入含有10μg/mL IL-1β培养基培养，实验组加入含有10μg/mL IL-1β+0.1 mg/mL曲美他嗪的培养基培养。通过细胞计数试剂（CCK-8）法和钙黄绿素/碘化丙啶（Calcein-AM/PI）染色法检测曲美他嗪的毒性作用；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨形成和炎症相关基因的表达；将大鼠随机为对照组、模型组和实验组，除对照组外，模型组和实验组采用前交叉韧带切断手术建立大鼠OA模型，实验组大鼠关节腔内注射100μL 0.1 mg/mL曲美他嗪，模型组和对照组分别注射等量的0.9%NaCl溶液。处理4周后，对各组关节进行组织学染色及评分。结果：CCK-8结果显示，与0 mg/mL比较，曲美他嗪浓度低于0.1 mg/mL时，对软骨细胞无明显毒性（P>0.05）;Calcein-AM/PI染色结果显示，与模型组比较，实验组活细胞数量增加，死细胞数量减少，细胞活力提高（P<0.01）;RT-qPCR结果显示，与模型组比较，实验组的性别决定区域Y相关的高迁移率族框9(SOX9)和蛋白聚糖（ACAN）相对表达量均升高（均P<0.05），白介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、环氧酶-2(COX-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达均降低（均P<0.05）。相较于模型组，实验组软骨层的损伤与变形明显缓解；与模型组相比，实验组的组织学评分降低（P<0.05）。结论：曲美他嗪具有减轻OA炎症反应和保护软骨的作用。

关键词

曲美他嗪 / 骨关节炎 / 炎症 / 软骨细胞外基质