基于TLR4信号通路研究利拉鲁肽对脂多糖诱导的原代小胶质细胞炎症反应的作用机制

摘要

目的：基于Toll样受体4(TLR4)信号通路，探索利拉鲁肽抑制脂多糖（LPS）诱导的原代小胶质细胞炎症反应的机制。方法：选取出生1 d SPF级SD大鼠，分离培养原代小胶质细胞，利用免疫荧光染色特异性蛋白Iba-1检测其纯度，将细胞随机分为5组：空白对照（N）组、脂多糖（LPS）组、利拉鲁肽（Li）组、脂多糖+利拉鲁肽（LL）组及脂多糖+TLR4抑制剂（LT）组。LPS组用LPS干预24 h,Li组用利拉鲁肽干预24 h,LL组用LPS干预24 h+利拉鲁肽干预24 h,LT组用LPS干预24 h+TAK-242干预24 h。用流式细胞仪测定各组细胞总凋亡率，以蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测IL-1β、TNF-α、TLR4、MyD88、TRAF6蛋白在各组中的表达情况。结果：与N组比较，LPS组细胞总凋亡率上升（P<0.05）；与LPS组比较，LL组和LT组细胞的总凋亡率呈下降趋势（P<0.05）。与N组比较，LPS组IL-1β、TNF-α、TLR4、MyD88、TRAF6蛋白相对表达量增高（P<0.05）；与LPS组比较，LL组和LT组IL-1β、TNF-α、TLR4、MyD88、TRAF6蛋白表达呈下降趋势（P<0.05）。结论：利拉鲁肽可能通过下调TLR4信号通路中关键因子表达抑制LPS诱导的原代小胶质细胞炎症反应，并改善细胞凋亡，保护神经系统。

关键词

利拉鲁肽 / TLR4 / 脂多糖 / 小胶质细胞

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81760154）; 广西自然科学基金资助项目（No.2017JJA10168）