绿原酸干预HepG2肝癌细胞诱导肿瘤相关巨噬细胞极化的体外研究

摘要

目的：研究绿原酸（CGA）对人肝癌细胞HepG2诱导的肿瘤相关巨噬细胞（TAM）极化的影响。方法：人单核巨噬细胞THP-1经100 mmol/L佛波酯（PMA）刺激48 h诱导分化为M0巨噬细胞，与HepG2细胞共培养，并用不同浓度CGA干预。倒置显微镜下观察细胞形态学变化，CCK-8法检测细胞活性，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测TAM相关标志物CD206、白细胞介素（IL）-10、IL-6和环氧化合酶2(COX-2)mRNA表达水平。结果：与HepG2共培养后贴壁M0巨噬细胞形态由扁平圆形转变为不规则圆形，并有伪足伸出和梭形细胞形成，共培养48 h时细胞活性最高（P<0.05）。CGA处理48 h后，在25～100μg/mL浓度范围内随着CGA浓度增加，TAM细胞活性增高（P<0.05）。50μg/mL、100μg/mL CGA处理TAM 48 h后，不规则圆形带伪足细胞和梭形细胞数量增多，M1型巨噬细胞相关标志物IL-6、COX-2表达上调，M2型巨噬细胞相关标志物IL-10、CD163表达下调（P<0.05），且100μg/mL CGA较50μg/mL干预作用更明显。结论：HepG2肝癌细胞能诱导巨噬细胞极化为M2样TAM,CGA干预后TAM向M1样极化转变。

关键词

绿原酸 / 肿瘤相关巨噬细胞 / HepG2肝癌细胞 / 极化