秦皮苷对脂多糖诱导的巨噬细胞极化的影响

摘要

目的：初步探讨秦皮苷对脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞向M1、M2型极化的影响。方法：体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞系，将细胞随机分为对照组、LPS处理组（模型组）以及LPS+秦皮苷组（实验组）。培养细胞24 h后，利用细胞活力检测试剂盒（CCK-8试剂）和活/死细胞（Calcein-AM/PI）双染试剂盒检测秦皮苷对细胞增殖的影响；通过1.1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）法测定秦皮苷的总抗氧化活性，二氯二氢荧光素二氢乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测各组细胞内活性氧（ROS）的表达水平；利用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测巨噬细胞相关基因的表达；免疫荧光染色观察巨噬细胞细胞内相关生物标志物[诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和CD206）]的表达水平。结果：秦皮苷浓度为20μg/mL时，能够明显促进巨噬细胞的增殖，巨噬细胞活力最好。DPPH和DCFH-DA荧光探针检测结果均显示秦皮苷具有良好总抗氧化能力，能够清除细胞内的ROS。与对照组相比，模型组中炎症相关基因白介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD86和iNOS的表达上升，抗炎相关基因精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206和白介素-10(IL-10)的表达上升（P<0.05）。通过秦皮苷处理后，与模型组相比，实验组中炎症相关基因表达下降，抗炎相关基因表达上升（P<0.05）；同时，实验组中M1巨噬细胞相关蛋白（iNOS）分泌受到抑制（P<0.001）,M2型巨噬细胞相关蛋白（CD206）表达升高（P<0.001）。结论：秦皮苷可以抑制LPS诱导的M1型巨噬细胞极化，促进巨噬细胞从M1表型向M2表型极化，对M1/M2亚型失衡具有调节作用，有利于维持其动态平衡，有望为炎症的临床治疗提供新的方式。

关键词

秦皮苷 / 氧化应激 / 巨噬细胞极化 / 炎症