多西环素对角膜瘢痕形成的影响

摘要

目的：研究多西环素对角膜瘢痕形成的影响。方法：（1）体外实验：收集人眼角膜基质分离并培养，使用免疫荧光双染鉴定所提取到的细胞为人角膜细胞。多西环素组在传代培养后加入重组人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人角膜细胞分化成角膜肌成纤维细胞，培养2 h后加入浓度为20 ng/mL的多西环素溶液，另设不加入任何药物的对照组和只加入TGF-β1的模型组，放入培养箱继续培养48 h。蛋白免疫印迹（Western blotting）检测CollagenⅠ和Fibronectin蛋白表达；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CollagenⅠ和Fibronectin mRNA相对表达量。（2）体内实验：采用36只雌性SD大鼠构建角膜碱烧伤模型，随机分为对照组和多西环素组，每组18只。采用体视显微镜观察大鼠角膜恢复情况并在第3、第7、第14天进行角膜混浊度评分，角膜取材后做HE染色观察大鼠角膜组织结构变化。结果：模型组细胞Fibronectin、CollagenⅠmRNA和蛋白相对表达量均较对照组升高（均P<0.05），多西环素组细胞Fibronectin、CollagenⅠmRNA和蛋白相对表达量均较模型组降低（均P<0.05）。与对照组相比，大鼠角膜碱烧伤后第7、第14天，多西环素组大鼠角膜混浊度评分更低（P<0.05）;HE染色图片，各个时间点多西环素组大鼠角膜基质结构更规整，第7天多西环素组上皮修复更佳、炎症细胞浸润更少。结论：多西环素可以抑制人角膜细胞分化为肌成纤维细胞，促进大鼠角膜碱烧伤后角膜愈合，减轻角膜瘢痕。

关键词

角膜瘢痕 / 角膜碱烧伤 / 多西环素 / 转化生长因子β1 / 角膜肌成纤维细胞