基于网络药理学和巨噬细胞炎症模型探讨积雪草酸抗动脉粥样硬化的作用机制

摘要

目的：基于网络药理学和巨噬细胞炎症模型探讨积雪草酸（AA）抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：首先，通过Swiss Target Prediction、CTD、GeneCards数据库获取AA相关靶点，GeneCards、TTD数据库获取AS相关靶点，之后通过Venny2.1.0在线工具映射获得AA与AS的交集靶点。采用String 11.5数据库和Cytoscape 3.7.2软件构建交集靶点的蛋白相互作用（PPI）网络图并筛选出核心靶点；通过David 6.8数据库对交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析，并通过微生信在线工具对富集结果进行可视化。最后采用Cytoscape 3.7.2软件构建出“药物—靶点—疾病—通路”网络模型图。构建脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型，通过ELISA法检测TNF-α释放水平，Annexin V-APC/7-AAD双染色法流式细胞术及Western blotting检测细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达，验证AA对巨噬细胞炎症和凋亡的影响。结果：网络药理学预测共获得AA抗AS的潜在作用靶点84个，GO和KEGG分析结果显示AA抗AS机制可能与调控TNF、NOD样受体、凋亡及PPAR等信号通路有关。细胞实验结果显示，与LPS组比较，AA高、低剂量组TNF-α水平降低，细胞凋亡率和Bax、Cyt C蛋白表达进一步提高，而Bcl-2蛋白表达下降（P<0.05或P<0.01）。结论：AA可通过多靶点、多通路发挥抗AS作用，诱导巨噬细胞凋亡和抗炎为其作用机制之一。

关键词

积雪草酸 / 动脉粥样硬化 / 网络药理学 / 巨噬细胞 / 凋亡 / 炎症

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81960056）; 广西自然科学基金资助项目（No.2021GXNSFAA196020;No.2018GXNSFAA281217;No.2017GXNSFBA198045）; 大学生创新创业项目（No.202010598034;No.202010598138;No.202110598020）