鼻咽癌细胞条件培养基诱导THP-1源巨噬细胞向M2型极化

摘要

目的：探讨鼻咽癌细胞系（5-8F、HONE1）来源的条件培养基（CM）对THP-1来源巨噬细胞极化方向的影响。方法：分别用50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L佛波酯（PMA）刺激人单核细胞白血病THP-1细胞诱导分化为M0型巨噬细胞（THP-1-M0组），24 h后，加入10 pg/mL脂多糖（LPS）和20 ng/mL干扰素（IFN）-γ处理细胞72 h，使M0向类M1型细胞方向极化（THP-1-M1组）；加入20 ng/mL IL-4和20 ng/mL IL-13处理THP-1-M0使其向类M2型方向极化（THP-1-M2组）。流式细胞术检测巨噬细胞标记物CD14、CD68、CD86、CD163和CD206的表达。制备鼻咽癌5-8F及HONE-1细胞的条件培养基，培养THP-1-M0细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测白细胞介素（IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α、转化生长因子（TGF）-β1基因表达，分析肿瘤细胞刺激M0巨噬细胞的极化方向。结果：100 nmol/L为PMA的最佳刺激浓度。THP-1-M1组CD68、CD86、CD163表达及IL-6、TNF-α、IL-10、TGF-β1基因表达上调，THP-1-M2组CD14表达下调，CD68、CD86、CD163、CD206表达及IL-10、TGF-β1基因表达上调（均P<0.05）。加入鼻咽癌细胞条件培养基后，TNF-α、TGF-β1表达降低，IL-10表达升高（均P<0.05）。结论：5-8F细胞条件培养基诱导THP-1源M0型巨噬细胞偏向M2表型极化，HONE1细胞条件培养基培养的M0型巨噬细胞极化为M1/M2混合表型。

关键词

THP-1 / 巨噬细胞 / 鼻咽癌 / 细胞极化