PIK3CA对中性粒细胞抗子宫内膜癌细胞增殖的影响及其对CEACAM1/β-catenin信号通路的调控作用

摘要

目的：探讨磷酸肌醇3激酶的p110α催化亚基（PIK3CA）对中性粒细胞抗子宫内膜癌（UCEC）细胞增殖的影响及其机制。方法：将PI3KCA过表达载体（pcDNA-PI3KCA）转染至UCEC细胞MFE-296后，与中性粒细胞dHL-60共培养24 h。取出培养下室的MFE-296细胞，CCK-8法检测MFE-296细胞增殖能力，RT-qPCR法检测MFE-296细胞内CEACAM1、β-catenin、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和白细胞介素-8(IL-8)mRNA表达，Western blotting法检测PIK3CA、CEACAM1和β-catenin蛋白表达。应用癌症基因组图谱（TCGA）和UCEC mRNA-seq数据分析PIK3CA在UCEC中的表达。免疫荧光检测UCEC患者组织中PIK3CA和CEACAM1的定位，Spearman法分析74例UCEC组织中PIK3CA表达与CEACAM1表达的相关性。结果：转染pcDNA-PI3KCA后，MFE-296细胞PIK3CA mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）；与dHL-60共培养24 h后，过表达PIK3CA的MFE-296细胞中VEGF-A、MMP9和IL-8 mRNA表达及CEACAM1和β-catenin蛋白表达上调（均P<0.05）。MFE-296与dHL-60共培养24 h后MFE-296细胞增殖率降低，而过表达PIK3CA减弱了dHL-60细胞对MFE-296细胞的增殖抑制作用（均P<0.05），且anti-CEACAM1处理后，过表达PIK3CA的MFE-296细胞增殖率降低（P<0.05）。TCGA数据库分析显示，PIK3CA在UCEC组织中的表达水平低于正常组织（P<0.0001）;Kaplan-Meier生存分析显示，PIK3CA高表达组生存率低于PIK3CA低表达组（P<0.05）。免疫荧光结果显示CEACAM1与PIK3CA蛋白在UCEC中的共定位，两者表达呈正相关关系（P<0.05）。结论：PIK3CA通过上调CEACAM1/β-catenin表达减弱中性粒细胞对UCEC细胞的增殖抑制作用。

关键词

PIK3CA / CEACAM1 / 细胞共培养 / 中性粒细胞 / 子宫内膜癌