低氧条件下调节EMT、糖异生及脂肪酸合成相关基因的表达促进肝癌细胞的增殖和迁移

摘要

目的：研究低氧条件对Hep3B肝癌细胞增殖、迁移的影响，探讨低氧对上皮—间质转化（EMT）、糖异生及脂肪酸合成相关基因的表达变化及意义。方法：克隆形成实验研究Hep3B的增殖能力，细胞划痕愈合和Transwell迁移实验研究Hep3B的迁移能力。肿瘤基因组图谱数据库（TCGA）和基因表达综合数据库（GEO）分析EMT相关基因SNAl1、SNAl2、CDH1、CDH2、ZEB1和Vimentin，糖异生相关基因PCK2、G6PC及脂肪酸合成相关基因ACACA的mRNA在肝细胞癌（HCC）与癌旁组织中的表达情况，并使用GEO数据库分析上述基因在低氧条件下的mRNA表达。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测上述基因在常氧和低氧条件下培养的Hep3B细胞中的mRNA表达情况。结果：低氧环境可以促进Hep3B细胞的增殖和迁移能力。与癌旁组织比较，TCGA和GEO数据库均显示，ZEB1和ACACA在肝癌组织中表达上调，G6PC和PCK2则下调，SNAl2和Vimentin仅在TCGA中显示上调，SNAl1和CDH1仅在GEO显示下调。RT-qPCR结果显示，与常氧组相比，低氧环境下的Hep3B细胞中EMT相关基因SNAl1、CDH1、CDH2的表达量降低（P<0.05），而SNAl2、Vimentin的表达量则升高（P<0.05），糖异生相关基因PCK2、G6PC和脂肪酸合成相关基因ACACA在低氧环境中的表达量均降低（P<0.05），而ZEB1的表达量差异无统计学意义（P>0.05）。结论：低氧微环境可以调节肝癌Hep3B细胞中EMT相关基因SNAl1、SNAl2、CDH1、CDH2和Vimentin以及代谢相关基因ACACA、G6PC和PCK2的表达，进而促进Hep3B细胞的增殖和迁移。

关键词

低氧 / 肝细胞癌 / 上皮—间质转化 / 代谢

基金资助

国家自然科学基金项目（No.81660464）; 广西自然科学基金项目（No.2016GXNSFAA380275）; 广西研究生教育创新计划项目（No.YCSW2021134）