栀子苷通过AMPK/SIRT1/NF-κB通路调节乳腺癌细胞增殖、焦亡和侵袭

摘要

目的：探究栀子苷（GEN）通过AMPK/SIRT1/NF-κB通路对乳腺癌细胞的增殖、焦亡和侵袭的影响。方法：体外培养人乳腺癌MCF-7细胞，将其分为对照组、GEN低、中、高剂量（L-GEN、M-GEN、H-GEN）组和H-GEN+AMPK抑制剂组。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验、克隆形成实验检测MCF-7细胞增殖，检测MCF-7细胞焦亡[观察细胞形态变化、检测乳酸脱氢酶（LDH）释放量]，Transwell实验检测MCF-7细胞侵袭，检测MCF-7细胞线粒体功能（JC-1法检测线粒体膜电位下降比例、Cell Titer-Glo?试剂盒检测ATP生成量），蛋白质免疫印迹（Western blotting）法检测AMPK/SIRT1/NF-κB通路相关蛋白表达。结果：与对照组比较，L-GEN组、M-GEN组、H-GEN组MCF-7细胞增殖率、克隆数、侵袭数减少，LDH释放量增加（均P<0.05），细胞密度降低、变圆、膨胀，在质膜上产生较大的气泡，表现出明显焦亡现象，以H-GEN组变化更为明显；与H-GEN组比较，HGEN+AMPK抑制剂组MCF-7细胞增殖率、克隆数、侵袭数增加，LDH释放量减少（均P<0.05），细胞焦亡现象减轻。与对照组比较，H-GEN组MCF-7细胞线粒体膜电位下降比例及p-AMPK、SIRT1、核NF-κB蛋白相对表达量升高，ATP生成量减少（P<0.05）；与H-GEN组比较，H-GEN+AMPK抑制剂组MCF-7细胞线粒体膜电位下降比例及p-AMPK、SIRT1、核NF-κB蛋白相对表达量降低，ATP生成量增加（均P<0.05）。结论：GEN能够诱导人乳腺癌MCF-7细胞线粒体功能障碍，抑制MCF-7细胞增殖和侵袭，促进其焦亡，其机制可能与激活AMPK/SIRT1/NF-κB通路有关。

关键词

栀子苷 / AMPK/SIRT1/NF-κB通路 / 乳腺癌 / 增殖 / 焦亡 / 侵袭

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81972793）