PP2Ac去甲基化在锰暴露诱导大鼠肝脏炎症性损伤中的作用研究

摘要

目的：研究亚急性及慢性锰暴露对SD大鼠肝脏的损伤效应，探索PP2Ac去甲基化修饰在锰暴露致肝脏炎症性损伤中的作用。方法：40只雄性SD大鼠按体重随机入组，分别设置4周（4 W）和16周（16 W）两个暴露时间点，每个时间点分两组（即4 W、16 W对照组和4 W、16 W锰暴露组），每组10只；锰暴露组腹腔注射MnCl₂·4H₂O（15 mg/kg），对照组注射同体积的生理盐水，每天1次，持续4 W、16 W。实验终点时分离大鼠肝脏，ICP-MS法检测血液及肝组织中锰的含量。苏木精—伊红（HE）染色观察肝脏的病理改变。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测肝脏炎症相关因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）、趋化因子CCL-2的表达。Western blotting法检测肝组织总PP2Ac、去甲基化PP2Ac及PP2Ac甲基化调控蛋白LCMT-1及PME-1的表达。结果：与4 W对照组相比，4 W、16 W锰暴露组全血锰含量显著升高（P<0.01）,4 W锰暴露组肝组织锰含量显著下降（P<0.05），而16 W锰暴露组肝组织锰含量显著升高（P<0.01）;HE染色结果显示，与4 W对照组相比，4 W锰暴露组出现肝血窦扩张，炎症细胞浸润，16 W锰暴露组与16 W对照组相比，肝索排列紊乱，细胞间隙增大，肝窦进一步扩张充血，大量肝细胞膜破裂；与4 W对照组相比，4 W锰暴露组仅肝脏炎症因子IL-6的表达呈上升趋势，16 W锰暴露组CCL-2、IL-6的mRNA表达与16 W对照组相比呈升高趋势，并且TNF-α的mRNA表达显著升高（P<0.05）;4 W、16 W锰暴露组的去甲基化PP2Ac表达水平升高（P<0.05），仅16W锰暴露组的甲基化PP2Ac修饰蛋白LCMT-1表达水平降低（P<0.01），不同时点锰暴露组PME-1、总PP2Ac蛋白表达无明显变化。结论：锰诱导大鼠肝脏产生炎症性损伤，可能与上调肝脏PP2Ac去甲基化有关。

关键词

锰暴露 / 肝损伤 / 炎症 / PP2Ac