RIPK3介导的巨噬细胞M2型极化在结直肠癌肝转移中的研究

摘要

目的：探究受体相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶3(RIPK3)介导的巨噬细胞M2型极化在结直肠癌肝转移（CRLM）中的作用及其相关机制。方法：收集CRLM患者结肠肿瘤及其癌旁组织，对肿瘤组织进行病理分析。通过RT-qPCR法检测RIPK3、CD68、精氨酸酶-1(Arg-1)表达量。采集CRLM患者和结肠癌患者外周血，通过流式细胞术检测巨噬细胞分型，利用ELISA检测血清白介素（IL）-1β、IL-6、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、IL-4、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10含量。使用慢病毒将PLKRIPK3和PLK-NC转染至THP-1细胞，采用PMA/IL4诱导为M2型巨噬细胞，通过RT-qPCR和Western blotting检测两组细胞极化程度。将两组细胞分别与人结肠癌细胞系WiDr共孵育，检测WiDr细胞迁移、侵袭变化和结肠癌相关转移1(MACC1)、原癌基因MYC(c-MYC)表达情况。结果：CRLM患者结肠肿瘤病理结构符合肠腺癌肝转移。与癌旁组织相比，RIPK3在CRLM肿瘤组织表达降低，CD68、Arg-1表达增加。与结肠癌患者相比，CRLM患者外周血中富集更多的M2型巨噬细胞，血清中IL-4、TGF-β、IL-10含量增加，IL-1β、iNOS含量减少。与WiDr+PLK-NC-THP-1组相比，WiDr+PLK-RIPK3-THP-1组被诱导为M2型巨噬细胞的程度减少，对WiDr细胞的促迁移和侵袭能力降低，MACC1、c-MYC表达量减少。结论：RIPK3表达降低通过诱导巨噬细胞向M2型极化，促进结直肠癌细胞MACC1、c-MYC表达和肿瘤转移。

关键词

结直肠癌 / 肝转移 / 丝氨酸/苏氨酸激酶3 / 免疫抑制性细胞 / 巨噬细胞