山楂叶总黄酮抑制小胶质细胞活化对脊髓损伤的影响

摘要

目的：探究山楂叶总黄酮（TFHL）对脂多糖（LPS）活化后的BV2小胶质细胞和脊髓损伤（SCI）大鼠的作用。方法：LPS诱导BV2小胶质细胞活化建立神经炎症模型；实验分为正常对照组、LPS组及TFHL低、中、高剂量组。根据Allen's法建立SCI模型；将大鼠随机分为假手术组、模型组和TFHL组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2的mRNA表达；流式细胞术检测活性氧（ROS）水平；蛋白免疫印迹检测TNF-α、IL-6的蛋白表达；Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估SCI大鼠的运动功能；苏木精—伊红（HE）染色观察脊髓组织结构完整性。结果：在细胞实验中，与正常对照组相比，LPS组和TFHL各剂量组TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、COX-2的mRNA相对表达水平均增高（P<0.000 1）;TFHL低剂量组的TNF-α、IL-6,TFHL中剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6以及TFHL高剂量组的TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、COX-2的mRNA表达水平均较LPS组降低（P<0.05）。与正常对照组相比，LPS组和TFHL各剂量组TNF-α、IL-6的蛋白表达量增高（P<0.000 1），而TFHL中剂量组的IL-6及TFHL高剂量组的TNF-α、IL-6蛋白表达量均较LPS组降低（P<0.01）。与正常对照组相比，LPS组和TFHL各剂量组ROS水平均升高（P<0.000 1），而TFHL各剂量组的ROS水平均较LPS组下降（P<0.000 1）。在动物实验中，与假手术组相比，模型组和TFHL组BBB评分均降低（P<0.000 1）,TFHL组第5天和第7天BBB评分均较模型组增高（P<0.05）。与模型组相比，TFHL组脊髓病理结构较完整，空洞面积较少。结论：TFHL可通过抑制小胶质细胞的激活，改善炎症微环境，从而发挥保护受损脊髓神经运动功能的作用。

关键词

山楂叶总黄酮 / 脊髓损伤 / BV2小胶质细胞 / 神经功能

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81860391）; 广西医学高层次骨干人才培养计划“139”计划（No.桂卫科教发（2020）15号）