基于铁死亡调节探讨秦皮素对动脉粥样硬化的作用及机制研究

摘要

目的：基于秦皮素对铁死亡的调节作用，进一步探讨秦皮素对动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：通过高脂饮食构建Apo E敲除(Apo E^-/-)小鼠动脉粥样硬化模型，随机分为正常饮食组（NC组）、高脂饮食组（HFD组）、铁死亡抑制剂组（Fer-1组）、秦皮素组（Fra组）和萝卜硫素组（Sul组）；用过氧化氢（H₂O₂）干预人原代脐静脉内皮细胞（HUVECs）构建体外AS模型，随机分为NC组、H₂O₂组、Fer-1组、Fra组和Sul组。油红O染色用于评估AS病变大小，血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和总胆固醇（TC）测定试剂盒用于评估脂质代谢。细胞计数实验（CCK-8）用于检测秦皮素毒性作用和细胞增殖能力，铁、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）试剂盒用于测定小鼠主动脉组织和HUVECs中铁死亡水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-q PCR）和蛋白免疫印迹（western blotting）实验主要通过检测谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）和血红素加氧酶1（HMOX1）表达水平以评估秦皮素的抗铁死亡作用。结果：秦皮素能够减轻AS小鼠血清脂质沉积和主动脉粥样硬化，并且保护HUVECs免受H₂O₂诱导的细胞死亡。与Fer-1组结果一致，秦皮素在体内和体外均能抑制促铁死亡生物标志物铁和MDA表达水平，上调抗铁死亡生物标志物GSH和GPX4表达水平。此外，秦皮素减轻了H₂O₂诱导的HUVECs发生铁死亡，而这种保护作用能被HMOX1特异性激活剂萝卜硫素所逆转。结论：秦皮素可能通过下调HMOX1抑制铁死亡，从而减轻AS。

关键词

动脉粥样硬化 / 铁死亡 / 秦皮素 / 血红素加氧酶1

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81960082）; 广西心脑血管疾病防治精准医学重点实验室资助项目（No.22-035-18）; 广西心脑血管疾病临床医学研究中心资助项目（No.AD17129014）; 广西医学高层次骨干人才“139”计划资助项目（No.G201901006）