牛磺酸影响人外周血T淋巴细胞增殖及分化功能的体外研究

摘要

目的：研究牛磺酸（Tau）对人外周血T淋巴细胞体外活化增殖及分化的影响及其作用机制。方法：无菌分离健康志愿者外周血淋巴细胞，建立植物凝集素（PHA）刺激T细胞体外活化增殖模型。实验设置对照组（control组）、PHA刺激组（PHA5μg/mL组）及Tau处理组（PHA+Tau 80 mmol/L组、PHA+Tau 160 mmol/L组）。细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测T淋巴细胞增殖率；瑞—吉染色法观察细胞形态及计算转化率；实时荧光定量PCR检测T细胞增殖标志物Ki67,Th1转录因子T-bet及细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),Th2转录因子GATA-3及白介素-4/6(IL-4/6)，凋亡相关因子Fas、FasL基因表达水平；活性氧（ROS）试剂盒检测细胞内ROS水平。结果：与control组相比，PHA 5μg/mL组T淋巴细胞转化率、增殖率、增殖标志物Ki67、Th1相关因子T-bet、IFN-γ、TNF-α、凋亡相关因子Fas基因表达及胞内ROS水平升高（P<0.05），凋亡相关因子FasL基因，Th2相关因子GATA-3、IL-6基因表达水平降低（P<0.05）。与PHA 5μg/mL组相比，PHA+Tau 80 mmol/L组与PHA+Tau 160 mmol/L组T淋巴细胞转化率、增殖率、Ki67基因表达及胞内ROS水平均下降（P<0.05）,Th2相关因子IL-4、IL-6基因表达水平均升高（P<0.05）,Th1相关因子IFN-γ、FasL基因表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）,PHA+Tau 80 mmol/L组Th1相关因子T-bet、TNF-α、Th2相关因子GATA-3及Fas基因表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,PHA+Tau 160 mmol/L组Th1相关因子T-bet、TNF-α、Th2相关因子GATA-3及Fas基因表达水平升高（P<0.05）。结论：Tau可能通过下调Ki67表达和增强Fas-AICD途径抑制T细胞增殖转化，并可能通过降低胞内ROS含量，提高Th1/Th2活化水平，调节Th1/Th2平衡偏向Th1分化，发挥调节T淋巴细胞活化增殖及分化的作用。

关键词

牛磺酸 / T淋巴细胞增殖 / Th1/Th2分化 / 免疫调节