基于Jurkat细胞分析circ＿0006689对系统性红斑狼疮中IL2的作用及机制研究

摘要

目的：在Jurkat细胞基础上初步探讨circ＿0006689在系统性红斑狼疮（SLE）中调控白介素2(IL2)的作用机制。方法：使用慢病毒转染Jurkat细胞构建circ＿0006689低表达株。用PMA、PHA活化低表达组（si-circ＿0006689组）、病毒空载组（si-NC组）及未转染组（control组）细胞后通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组IL2、miR-95-5p的相对表达量；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞IL2浓度；生物信息学分析预测circ＿0006689的目标miRNA及IL2的目标miRNA；双荧光素酶报告实验检测circ＿0006689与miR-95-5p、miR-95-5p与IL2的靶向关系。结果：Jurkat细胞活化后IL2分泌显著增加（P<0.05）；下调circ＿0006689后细胞IL2表达及分泌减少（P<0.05）,miR-95-5p表达水平显著升高（P<0.05）。双荧光素酶报告实验提示circ＿0006689与miR-95-5p、miR-95-5p与IL2存在结合作用。结论：在Jurkat细胞中低表达circ＿0006689可抑制IL2的表达；miR-95-5p可分别与circ＿0006689、IL2结合；circ＿0006689可能在SLE中通过竞争性结合miR-95-5p影响IL2的表达及分泌。

关键词

系统性红斑狼疮 / 环状RNA / 微小RNA / 白介素2