小鼠颌下腺类器官辐射损伤模型的建立

摘要

目的：本实验拟建立小鼠颌下腺（SMG）的类器官辐射损伤模型，为唾液腺辐射损伤修复相关研究提供模型支持。方法：取4周龄小鼠SMG组织利用胶原酶消化成单细胞悬液，接种于基质胶中培养并传代。利用倒置相差显微镜观察SMG类器官生长形态。组织包埋后通过免疫荧光技术检测细胞角蛋白（CK8）及水通道蛋白（AQP5）表达情况。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定培养上清液中唾液淀粉酶（AMS）含量，利用电子直线加速器对小鼠SMG类器官模型进行不同剂量（0 Gy、5 Gy、10 Gy、15 Gy）的X线照射；通过ATP细胞活力试剂盒检测各组细胞活性。结果：小鼠SMG类器官呈类圆形球体生长，随着传代培养可见小叶结构形成。小鼠SMG类器官中CK8、AQP5染色阳性，细胞培养上清液中可检测到AMS表达，证实SMG类器官属腺上皮来源并具有分泌AMS功能。放射性照射使类器官增殖速度减慢，球体周围近似崩解形态。ATP细胞活力检测显示，细胞活力随着照射剂量的增加而下降（P<0.05），照射剂量为10 Gy时，细胞活力约为0 Gy组的50%。结论：小鼠SMG类器官辐射损伤模型构建成功，且10 Gy为唾液腺辐射损伤修复相关研究的最适宜的放射剂量。

关键词

颌下腺细胞 / 类器官 / 辐射损伤