成脂诱导剂通过PP2Ac调控人肝星状细胞活化的体外研究

摘要

目的：研究成脂诱导剂MDI对活化的人肝星状细胞的作用及其机制。方法：体外培养人肝星状细胞系LX-2细胞，实验分为4组，即空白对照组、溶剂对照组、重组人转化生长因子β1(TGF-β1)组、TGF-β1+MDI组。油红O染色法检测细胞内脂滴变化，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测肝纤维化标志物肌动蛋白α2(ACTA2)、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)基因相对表达量。线粒体特异性荧光探针检测TGF-β1/MDI干预后LX-2细胞内线粒体数量的变化。采用western blotting法检测各组蛋白磷酸酶2A催化性C亚基（PP2Ac）蛋白表达。结果：与空白对照组和溶剂对照组比较，TGF-β1组LX-2细胞胞体增大、呈多边形且胞质增多、未见明显脂滴、线粒体数量增加，肝纤维化标志物ACTA2、COL1A1和TIMP-1mRNA表达水平以及PP2Ac去甲基化蛋白表达水平升高（均P<0.01）。与TGF-β1组比较，TGF-β1+MDI组细胞变小、胞质内小脂滴数量增加、线粒体数量减少，ACTA2、COL1A1和TIMP-1 m RNA表达水平以及PP2Ac去甲基化蛋白表达水平降低（均P<0.05）。结论：TGF-β1和MDI可能通过调控肝星状细胞的PP2Ac去甲基化水平调控人肝星状细胞活化，且与脂质生成以及线粒体数量有关。

关键词

成脂诱导剂 / 蛋白磷酸酶2A催化性C亚基 / 肝星状细胞