lncRNA-H19/IGF1R调控高血压脑出血后脑微血管内皮细胞自噬的机制研究

摘要

目的：分析lncRNA-H19(H19)在高血压脑出血（HICH）患者体内的表达特征，并探讨H19影响人脑微血管内皮细胞（HBMECs）自噬与氧糖剥夺（OGD）损伤的机制。方法：收集健康者、高血压患者和HICH患者血液样本，采用lncRNA array芯片检测lncRNA表达谱，RT-qPCR检测H19表达水平并分析其与脑出血量及NIHSS评分的关系；预测H19的靶蛋白，RT-qPCR检测其mRNA水平并分析其与H19的相关关系；采用OGD处理敲降或过表达H19及其互作蛋白的HBMECs，而后采用免疫荧光检测细胞自噬情况，western blotting检测自噬相关蛋白（LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ）以及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子（VEGF）。结果：H19在高血压患者（t=0.021,P<0.05）和HICH患者（t=0.018,P<0.05）中显著高于健康者；并随HICH分级升高而增加，与脑出血量及NIHSS评分呈正相关关系（R2=0.087,R2=0.113,P<0.05）；随OGD处理时间增加，HBMECs中H19水平增加（t=0.023,P<0.05）;IGF1R m RNA在HICH患者体内低于健康者（t=0.015,P<0.05），且随HICH加剧而降低（t=0.043,P<0.05）;HICH患者体内H19与IGF1R呈负相关关系（R2=0.187,P<0.05）;OGD处理下调HBMECs中IGF1R蛋白，敲降H19可使OGD-HBMECs中IGF1R增加；在OGD-HBMECs中LC3自噬体、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、HIF-1α和VEGF均因敲降H19或过表达IGF1R而减少，但同时过表达IGF1R及H19后则均增加。结论：H19与HICH病情相关，下调H19可增加IGF1R，进而缓解OGD诱导的HBMECs自噬和损伤。

关键词

长链非编码RNA-H19 / 高血压脑出血 / 脑微血管内皮细胞 / 胰岛素样生长因子1受体 / 自噬 / 氧糖剥夺