1,25（OH）₂D₃通过上调IL-10受体抑制软骨细胞凋亡缓解骨关节炎的分子机制研究

摘要

目的：探讨骨化三醇[1,25（OH）₂D₃]对创伤性骨关节炎（PTOA）大鼠膝关节软骨的保护作用及其分子机制。方法：构建PTOA大鼠模型。将20只SD大鼠随机分为对照组、假手术组、PTOA组和1,25（OH）₂D₃组，每组5只。采用免疫组织化学（IHC）染色法检测膝关节软骨IL-10受体（IL-10R）和基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的表达，番红O染色法测定大鼠胫骨关节头软骨的损伤程度。分离大鼠骨髓干细胞（BMSCs），将细胞分为未分化组、分化组、1,25（OH）₂D₃干预组和1,25（OH）₂D₃+IL-10R抗体组。采用荧光定量PCR（RT-q PCR）法检测细胞中MMP-13和胶原蛋白10a1（Col10a1）m RNA表达，western blotting法检测磷酸化（p）-JAK、JAK、转化生长因子-β1（TGF-β1）、SOX9、Smad2和Runx2蛋白表达，TUNEL染色法检测细胞凋亡率。结果：IHC染色显示，与对照组相比，PTOA组IL-10R表达水平降低，MMP-13表达水平升高（均P<0.05）；与PTOA组相比，1,25（OH）₂D₃组IL-10R表达水平升高，MMP-13表达水平降低（均P<0.05）。番红O染色结果显示，PTOA组软骨层厚度低于对照组（P<0.05）,1,25（OH）₂D₃组软骨层厚度高于PTOA组（均P<0.05）。与分化组相比，1,25（OH）₂D₃干预组细胞MMP-13m RNA相对表达水平降低，Col10a1 m RNA相对表达水平及p-JAK、TGF-β1、SOX9、Smad2和Runx2蛋白表达水平升高（均P<0.05）,TUNEL阳性细胞率降低（P<0.05）。与1,25（OH）₂D₃干预组比较，1,25（OH）₂D₃+IL-10R抗体组细胞部分逆转了上述指标（P<0.05）。结论：1,25（OH）₂D₃可能通过上调膝关节软骨IL-10R表达，抑制软骨细胞凋亡，从而发挥保护PTOA大鼠膝关节软骨的作用。

关键词

骨关节炎 / 膝关节软骨 / 骨化三醇 / IL-10受体