CDKL1在肺腺癌中的表达及其对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响

摘要

目的：探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白样激酶1(CDKL1)在肺腺癌（LUAD）中的表达及其对LUAD细胞增殖、侵袭和迁移能力等细胞恶性生物学行为的影响。方法：采用TCGA数据库分析CDKL1基因在LUAD组织和正常肺组织中的表达差异；利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析CDKL1基因表达水平与LUAD患者预后的关系；收集78例行手术切除的LUAD组织和对应癌旁组织，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹（western blotting）法检测LUAD组织和癌旁组织中CDKL1 mRNA和蛋白的表达水平，并分析CDKL1表达水平与LUAD患者临床病理特征的关系。体外培养LUAD细胞系NCI-H1975，并将CDKL1过表达质粒及其空载质粒转染至NCI-H1975细胞中，分别为空白对照（blank）组、空载（Vector）组和CDKL1过表达（oe-CDKL1）组。然后采用细胞增殖检测试剂盒（CCK-8）和BrdU法检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡水平；Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力变化；Western blotting法检测细胞凋亡蛋白Cleaved-caspase-3蛋白表达水平。结果：与正常肺组织比较，CDKL1在人LUAD肿瘤组织中低表达（P<0.05），且其低表达与LUAD患者肿瘤大小、TNM分期、分化程度和淋巴结转移等病理参数及不良预后显著相关（P<0.05）；与blank组和Vector组比较，oe-CDKL1组NCI-H1975细胞CDKL1基因显著上调（P<0.05），细胞增殖活性显著下降（P<0.05），细胞侵袭和迁移能力显著降低（P<0.05），细胞凋亡增加（P<0.05），以及Cleaved-caspase-3蛋白表达水平显著上调（P<0.05）。结论：CDKL1在LUAD肿瘤组织中低表达，其过表达可抑制LUAD细胞增殖、侵袭和迁移，并诱导细胞凋亡。

关键词

肺腺癌 / 细胞周期蛋白依赖性蛋白样激酶1 / 细胞增殖 / 侵袭 / 迁移