绿原酸联合伏立康唑对大鼠侵袭性肺曲霉病的干预效果及免疫机制

摘要

目的：研究绿原酸（CRA）联合伏立康唑（VRC）对侵袭性肺曲霉病的体内干预效果及免疫机制。方法：将大鼠分为正常对照组、模型组、CRA组、VRC组、联合治疗组（CRA+VRC组），成功建立侵袭性肺曲霉病大鼠模型后，正常对照组和模型组给予生理盐水，其余各组分别给予CRA单药、VRC单药及CRA+VRC联合干预7 d。观察大鼠一般情况以评估全身感染的严重程度；测定大鼠肺组织真菌负荷、肺泡灌洗液中半乳甘露聚糖（GM）含量；采用苏木精—伊红（HE）以及六胺银（PASM）染色观察肺部感染灶病理结构变化；免疫组化法检测CD68、诱导型一氧化氮合酶（i NOS）和精氨酸酶-1(Arg-1)蛋白表达水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肺组织匀浆中巨噬细胞的M1表型细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及M2表型细胞因子白细胞介素-10(IL-10)水平。结果：与模型组比较，CRA+VRC组大鼠一般状况最佳，且体重下降趋势明显减缓（P<0.05），真菌负荷及肺泡灌洗液中GM浓度显著降低（P<0.01）。模型组大鼠肺组织血管、支气管明显受真菌侵袭，大量菌丝、孢子生长，且有广泛炎症、出血，而CRA+VRC组大鼠肺组织则菌丝明显减少，损伤较轻。与模型组比较，CRA+VRC组大鼠肺组织CD68、Arg-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01），而i NOS蛋白表达水平显著升高（P<0.05），肺组织TNF-α、IL-6水平均明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论：CRA联合VRC对侵袭性肺曲霉病模型大鼠具有协同治疗作用，其作用机制可能与CRA促进巨噬细胞M1表型极化有关。

关键词

绿原酸 / 伏立康唑 / 侵袭性肺曲霉病 / 巨噬细胞 / 极化 / 细胞因子

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.82104499;No.82160783）; 广西科技厅重点研发计划项目（No.桂科AB21196010）; 中国博士后科学基金第73批面上资助项目（No.2023MD734158）; 广西自然科学基金青年科学基金资助项目（No.2023GXNSFBA026146）; 广西医科大学第一附属医院临床研究攀登计划青年科技启明星计划资助项目（No.YYZS2020016）; 广西卫健委自筹经费科研课题青年基金项目（No.Z20200825）