lnc85通过调节CDC42的表达促进肝癌细胞增殖

摘要

目的：探讨长链非编码RNA RP11-85G21.1(lnc85)对肝癌细胞增殖的作用及可能机制。方法：RNA全转录组测序结合实时荧光定量PCR(RT-qPCR)筛选验证肝癌中差异高表达的lnc85；利用lnc85过表达/空载慢病毒感染细胞，构建lnc85过表达肝癌细胞株（OE）和对照细胞（control）;RNA下拉实验（RNA pull-down）联合质谱筛选lnc85互作蛋白并进行蛋白免疫印迹（western blotting）验证；MTT实验、细胞克隆形成实验分析lnc85过表达对细胞增殖的影响；生物信息学分析lnc85互作蛋白表达水平及对生存的影响。结果：RNA全转录组测序发现，与对照相比，lnc85在肝癌患者血浆外泌体中明显高表达（P<0.001）,RT-qPCR验证lnc85在3种肝癌细胞中显著升高（P<0.01,P<0.001）;RNA pull-down联合质谱分析发现CDC42为lnc85的互作蛋白，RT-qPCR证实CDC42水平在肝癌细胞显著升高（P<0.001）；且lnc85过表达的肝癌细胞中，CDC42蛋白水平显著上调（P<0.001），细胞增殖能力显著增强（P<0.01）；生物信息学分析发现，肝癌患者CDC42的表达水平显著高于健康对照（P<0.001），并随着肿瘤等级的增高而增高；高表达CDC42的肝癌患者预后不良（P<0.001）。结论：lnc85在肝癌中高表达，可能通过靶向调节CDC42的表达促进肝癌细胞的增殖。

关键词

肝癌 / 长链非编码RNA RP11-85G21.1 / 细胞分裂周期蛋白42 / RNA下拉实验 / 细胞增殖