α7nAChR抑制MyD88依赖性Zonulin释放改善脑梗死大鼠肠道炎症和肠屏障损伤

摘要

目的：观察α7型烟碱乙酰胆碱受体（α7nAChR）激动剂PNU282987对脑梗死大鼠肠道炎症和肠屏障损伤的影响。方法：将36只雄性SD大鼠随机分为假手术（sham）组、中脑动脉栓塞（MCAO）组和PNU282987组。MCAO组和PNU282987组采用Longa改良线栓法制备MCAO模型，PNU282987组腹腔注射1 mg/kg PNU282987，连续7 d。苏木精—伊红（HE）染色观察肠道黏膜病理改变，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结肠组织肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素（IL-6）水平及血清二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（DLA）、内毒素（ET）水平，免疫组化法检测结肠组织Toll样受体2(TLR2)蛋白表达，western blotting法检测结肠组织紧密连接关键蛋白咬合蛋白（Occludin）、闭合蛋白（Claudin-1）、连蛋白（Zonulin）、带状闭合蛋白（ZO-1）、TLR2、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果：与sham组比较，MCAO组大鼠肠上皮脱落、肠绒毛排列紊乱及黏膜下层炎性浸润，血清DAO、DLA、ET水平及结肠组织TNF-α、IL-6含量显著增高，结肠组织Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达显著下调，Zonulin、TLR2、MyD88、p-NF-κB蛋白表达显著上调（均P<0.05）。与MCAO组比较，PNU282987组大鼠肠上皮损伤减轻，血清DAO、DLA、ET水平及结肠组织TNF-α、IL-6含量显著降低，结肠组织Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达显著上调，Zonulin、TLR2、MyD88、p-NF-κB蛋白表达显著下调（均P<0.05）。结论：PNU282987可以显著改善脑梗死大鼠肠道炎症及肠屏障损伤，其机制可能与抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路有关。

关键词

7型烟碱乙酰胆碱受体 / 脑梗死 / 肠屏障损伤 / Zonulin / 髓样分化因子88

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81360564;No.81760885）; 广西自然科学基金资助项目（No.2017GXNSFDA198011）