牡荆素对脊髓损伤大鼠运动功能和炎症反应的影响

摘要

目的：探究牡荆素（VT）对脊髓损伤（SCI）大鼠和脂多糖（LPS）诱导的BV2小胶质细胞的影响。方法：体内实验：将SD大鼠分为假手术组（sham组）、模型SCI组（SCI组）和VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估大鼠的运动功能；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测大鼠炎症因子基因和蛋白表达；苏木精—伊红（HE）染色观察脊髓组织结构。体外实验：将BV2小胶质细胞分为正常对照组（control组）、LPS组、VT低、中、高、剂量组和VT高剂量单独给药组，LPS诱导BV2小胶质细胞活化构建体外神经炎症模型；细胞计数试剂盒（CCK-8）法筛选VT安全浓度范围；RT-qPCR和蛋白质免疫印迹法（western blotting）检测细胞炎症基因和蛋白表达水平。结果：体内实验：与SCI组比较，VT中、高剂量组的BBB评分明显升高，损伤第7天，VT中剂量组评分显著高于VT高剂量组（均P<0.05）;VT中剂量组TNF-α mRNA表达较SCI组降低，VT中、高剂量组IL-10 mRNA表达较SCI组显著升高（均P<0.05）;VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组的TNF-α蛋白水平显著降低（均P<0.05）,VT各剂量组的IL-10蛋白水平显著升高（均P<0.05）;HE结果显示，sham组脊髓组织结构完整，神经元数量较多、排列较为规则整齐；SCI组脊髓组织炎症细胞浸润，出现较多空洞，神经元减少萎缩且排列不整齐；与SCI组比较，VT治疗组损伤更小，炎症浸润减轻较为明显。体外实验：与LPS组相比，VT各剂量组的TNF-α m RNA表达显著降低（均P<0.05），且成剂量依赖性降低；VT各剂量组TNF-α蛋白表达量降低（均P<0.001）。结论：VT通过抑制大鼠炎症反应，减轻脊髓组织病理学损伤，改善损伤后脊髓局部微环境，从而保护受损脊髓神经元，达到促进运动功能恢复的作用。

关键词

牡荆素 / 脊髓损伤 / 炎症反应 / 神经保护

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81860391）; 广西自然科学基金资助项目（No.2023GXNSFDA026050）