红景天苷调控lncRNA HOTAIR/NF-κB促进脊髓损伤后运动功能机制研究

摘要

目的：探讨红景天苷（SAL）调节长链非编码核糖核酸（lncRNA）HOX转录反义RNA(HOTAIR)对脊髓损伤（SCI）后运动功能的影响。方法：将27只SD大鼠随机分为假手术组、SCI组和SCI+SAL组。采用改良Allen法建立SCI大鼠模型，BBB评分检测大鼠后肢运动功能变化，苏木精—伊红染色（HE）及尼氏染色观察脊髓组织结构及神经元数量，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定HOTAIR和相关炎症因子表达情况。在体外构建lncRNA HOTAIR过表达星形胶质细胞，随后将构建的细胞和原代星形胶质细胞各分为8组，即control组、不同浓度SAL组（6.25μg/mL、12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL），采用细胞计数试剂盒（CCK-8法）检测细胞存活率。利用脂多糖（LPS）构建继发性SCI炎症模型并给予不同浓度SAL进行干预，RT-qPCR法检测lncRNA HOTAIR、IL-6和TNF-α基因表达，蛋白质免疫印迹法（western blotting）以及酶联免疫吸附试验（ELISA）分别测定NF-κB通路和炎症因子蛋白表达情况。结果：SAL干预明显提高了SCI大鼠的BBB评分，减少组织结构破坏以及神经元损伤并下调SCI后HOTAIR和炎症因子（TNF-α、IL-6）的表达。在体外实验中与control组相比，SAL各剂量组星形胶质细胞的生存率均无显著变化；进一步研究发现SAL能够调控lncRNA HOTAIR降低LPS刺激的星形胶质细胞炎症因子的表达；同时SAL可以靶向lncRNA HOTAIR下调p-NF-κB p65、p-IκB-α、IKKβ蛋白和炎症因子的表达。结论：SAL能够促进SCI大鼠运动功能恢复，其机制可能与减轻炎症反应，抑制lncRNA HOTAIR的表达有关。

关键词

红景天苷 / HOX转录反义RNA / 炎症 / 脊髓损伤

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81960773）; 广西自然科学基金资助项目（No.2023GXNSFAA026149）; 广西医科大学“四新”立项项目（No.SX202228）; 广西研究生教育创新计划资助项目（No.JGY2022075）