沉默钙离子通道相关基因CACNA1A对人骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响

摘要

目的：探讨沉默钙离子(Ca²⁺)通道相关基因CACNA1A对骨肉瘤（OS）细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法：采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测CACNA1A在临床OS患者瘤组织及其瘤旁组织中的表达。比较成骨细胞（hFOB1.19细胞）与OS细胞系（MNNG和SJSA-1细胞）中CACNA1A的表达。将敲除CACNA1A的小干扰RNA（siCACNA1A）及其对照（siControl）分别转入MNNG、SJSA-1细胞中，观察沉默CACNA1A表达后OS细胞内的Ca²⁺分布情况；采用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验、划痕实验和Transwell实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力。建立裸鼠皮下移植瘤模型，比较siCACNA1A组和siControl组成瘤体积和瘤重，免疫组织化学染色（IHC）检测成瘤组织中CACNA1A蛋白表达水平。结果：与瘤旁组织比较，OS患者瘤组织CACNA1A表达水平升高（P<0.05）；与h FOB1.19细胞比较，MNNG和SJSA-1细胞中CACNA1A表达水平升高（P<0.05）；与siControl组相比，siCACNA1A组OS细胞内的Ca²⁺分布减少，细胞增殖、侵袭和迁移能力受到显著抑制（P<0.05）。动物实验显示，与siControl组比较，siCACNA1A组裸鼠肿瘤体积和重量显著减小（P<0.05）。IHC结果显示，与siControl组相比，siCACNA1A组皮下肿瘤的CACNA1A相对免疫染色强度降低（P<0.001）。结论：沉默Ca²⁺通道相关基因CACNA1A可抑制OS细胞的增殖和转移以及裸鼠体内肿瘤的生长。

关键词

钙离子通道 / 骨肉瘤 / CACNA1A