石墨相氮化碳二维纳米片载洋川芎内酯Ⅰ应用于缺血性脑卒中大鼠的治疗研究

摘要

目的：探讨石墨相氮化碳（g-C₃N₄）二维纳米片负载洋川芎内酯I（SEI）对缺血性脑卒中大鼠的治疗作用。方法：利用三聚氰胺通过热相反应生成层状g-C₃N₄，热剥酸剥后得到薄层g-C₃N₄纳米片并进行表征；将SEI负载到g-C₃N₄纳米片上，通过紫外可见吸收光谱测定上清中的SEI，计算g-C₃N₄负载SEI质量比，测定SEI-g-C₃N₄复合纳米片在1 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h的药物释放情况；SD大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）造模前48 h通过脑立体定位注射SEI-g-C₃N₄复合纳米片，造模后24 h进行神经行为学评分，评分结束后取材分别进行TTC染色、TUNEL染色和HE染色。结果：通过表征实验，制备的g-C₃N₄纳米片尺寸小（约100 nm）、比表面积大、分散性好、表面带正电荷（33.3 mV）；紫外可见吸收光谱测定结果显示，g-C₃N₄已成功负载SEI，且SEI/g-C₃N₄质量比为15.06；药物释放结果显示，24 h时SEI的释放率接近50%；与sham组相比，MCAO组神经功能缺失评分显著升高（P<0.000 1），表明造模成功；与MCAO组相比，MCAO+SEI组神经功能缺失评分减少（P>0.05）,MCAO+SEI-g-C₃N₄组神经功能缺失评分减少（P<0.001）；与MCAO+SEI组相比，MCAO+SEI-g-C₃N₄组神经功能缺失评分减少（P<0.01）;TTC染色结果表明，与sham组相比，MCAO组的脑梗死面积显著增加（P<0.000 1）；与MCAO组相比，MCAO+SEI组梗死面积减少（P<0.000 1）,MCAO+SEI-g-C₃N₄组脑梗死面积显著减少（P<0.000 1）；与MCAO+SEI组相比，MCAO+SEI-g-C₃N₄组脑梗死面积减少（P<0.001）;TUNEL染色结果表明，与sham组相比，MCAO组的凋亡率升高（P<0.000 1），表明造模成功；与sham组相比，MCAO+SEI-g-C₃N₄组凋亡率升高（P>0.05）；与MCAO组相比，MCAO+SEI-g-C₃N₄组凋亡率减少（P<0.001）；体内生物安全性实验结果表明，与sham组相比，SEI组、SEI-g-C₃N₄组大鼠体重无统计学差异，且皮层脑组织结构和细胞形态无明显病理性变化。结论：成功制备了生物安全性较好的SEI-g-C₃N₄复合纳米片，且其能够减少MCAO大鼠的脑梗死面积，抑制细胞凋亡，减轻脑组织病理性变化，并且能改善大鼠的神经行为功能，表明SEI-g-C₃N₄复合纳米片可用于治疗缺血性脑卒中大鼠。

关键词

石墨相氮化碳 / 洋川芎内酯Ⅰ / 缺血性脑卒中大鼠

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.82360273）; 广西重点研发计划资助项目（No.桂科AB23026023）