水晶兰苷调控巨噬细胞极化减少THP-1源性泡沫细胞形成

摘要

目的：探讨水晶兰苷（MON）对巨噬细胞极化和THP-1源性泡沫细胞形成的影响。方法：THP-1细胞与100 ng/mL佛波酯（PMA）共孵育48 h诱导M0巨噬细胞，采用流式细胞术进行鉴定；采用不同浓度的氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）(0μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL)、不同的ox-LDL干预时间（0 h、3 h、6 h、12 h、24 h）处理巨噬细胞以诱导泡沫细胞；采用ox-LDL或MON干预巨噬细胞，CCK-8检测细胞活力；设置分组：control组、ox-LDL组和ox-LDL+MON组，采用油红O染色观察各组细胞脂质吞噬情况，采用western blotting、荧光定量PCR(RT-qPCR)评估巨噬细胞极化表现及其与铁死亡相关信号通路的结果。结果：ox-LDL呈浓度和时间依赖性增加iNOS、TNF-α蛋白表达；ox-LDL能显著降低细胞活力，200μmol/L MON可显著恢复细胞活力，单纯MON浓度高达1 000μmol/L时，细胞活力下降；经ox-LDL诱导可观察到细胞内大量明显红色脂滴，加入MON处理，细胞内的脂滴可见明显减少；与对照组比较，ox-LDL诱导的巨噬细胞CD86 mRNA、iNOS蛋白表达水平升高，CD206 mRNA、Arg-1、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平降低，而经过MON干预后，CD86 mRNA、iNOS蛋白表达水平降低，Arg-1、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平升高，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：MON通过减少巨噬细胞M1极化，促进M2极化，从而抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成、增强细胞活力，这可能与抑制铁死亡相关。

关键词

水晶兰苷 / 巨噬细胞 / 极化 / 泡沫细胞 / 铁死亡

基金资助

国家自然科学基金资助项目(No.82360456;No.81901394)