线粒体氧化应激在染铅小胶质细胞炎性活化中的作用研究

摘要

目的：探讨线粒体氧化应激在铅（Pb）导致的小胶质细胞炎症反应中的作用及机制。方法：将BV2小胶质细胞分为4组，分别用0μmol/L（对照组）、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L乙酸铅处理BV2细胞，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小胶质细胞白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α mRNA的表达水平，免疫荧光观察小胶质细胞激活状态以及线粒体活性氧（mtROS）表达，JC-1染色检测线粒体膜电位；将C57BL/6小鼠分为对照组、Pb染毒组（Pb组）（100 ppm）、MitoTEMPO处理组（MitoTEMPO组）（5 mg/kg）、MitoTEMPO联合Pb处理组（MitoTEMPO+Pb组），酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定小鼠血清及大脑皮层炎症因子IL-1β和TNF-α水平，蛋白质免疫印迹（western blotting）法测定小鼠海马NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白水平。结果：Pb可使BV2小胶质细胞激活，与对照组相比，Pb组的IL-6、IL-8和TNF-α mRNA水平出现剂量依赖性升高，mtROS增高，线粒体膜电位下降；MitoTEMPO可抑制Pb导致的小鼠海马区小胶质细胞活化，血清及大脑皮层炎症因子IL-1β和TNF-α水平下降，海马NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白水平增高（均P<0.05）。结论：Pb导致线粒体氧化应激，可使小胶质细胞激活，其机制可能与NLRP3炎症小体活化有关。

关键词

铅 / 小胶质细胞 / 线粒体氧化应激 / 炎症反应 / NLRP3炎症小体