锰诱导BV2细胞炎症活化与线粒体自噬有关

摘要

目的：探究锰诱导的BV2细胞炎症活化是否与线粒体自噬有关。方法：小鼠小胶质细胞BV2予以不同浓度锰暴露（0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）12 h，并以1μg/mL脂多糖（LPS）为阳性对照组；刃天青法检测细胞活性；荧光探针检测溶酶体数量及荧光强度变化；透射电镜观察自噬变化；共聚焦显微镜观察溶酶体和线粒体荧光共定位的程度；蛋白免疫印迹（western blotting）实验检测不同浓度锰暴露12 h后细胞炎症蛋白NLRP3、自噬相关蛋白（p62、LC3-Ⅱ/Ⅰ）以及线粒体外膜蛋白VDAC1的表达水平；线粒体自噬抑制剂巴弗洛霉素A1预处理验证锰暴露对自噬流及上述炎症标志蛋白表达的影响。结果：BV2细胞染锰浓度≥50μmol/L时，BV2细胞存活率下降，NLRP3表达上调（P<0.01），溶酶体数量及与线粒体共定位显著增加（P<0.05）；锰暴露组VDAC1和自噬标志蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达水平下降，p62的蛋白表达水平升高（P<0.05）；巴弗洛霉素A1预处理后，显著逆转除p62外的其他自噬标记蛋白表达（P<0.05）。结论：50～100μmol/L染毒剂量下，锰诱导BV2细胞炎症活化和线粒体自噬增加；巴弗洛霉素A1抑制线粒体自噬可促进锰暴露诱导的BV2细胞炎症活化。

关键词

锰 / 炎症 / 线粒体自噬 / 小胶质细胞