Col003对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的保护作用

摘要

目的：探讨热休克蛋白47(HSP47)抑制剂Col003对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障（BBB）的保护作用及其可能机制。方法：将大鼠随机分成假手术组、模型组、丁苯酞组、Col003组，采用线栓法构建大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型模拟脑缺血再灌注损伤，拔除线栓后丁苯酞组大鼠经腹腔注射丁苯酞（5 mg/kg）,Col003组大鼠经尾静脉注射Col003(50μmol/L)，两种药物的给药频次和持续时间均为每天1次，连续3 d，假手术组仅分离颈总动脉。采用蛋白免疫印迹法（western blotting）检测HSP47在大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中的表达水平。通过TTC染色、神经运动功能评分、伊文思蓝渗透性实验评估大鼠脑功能障碍及BBB的损伤程度。通过western blotting检测大鼠脑组织中紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin、Claudin5）以及间充质标志蛋白（a-SMA、Collagen I）的表达来观察Col003对大鼠脑缺血再灌注诱导的内皮—间质转化（EndMT）的影响，以进一步探讨Col003影响大鼠脑缺血再灌注后BBB损伤的可能机制。结果：在大鼠脑缺血再灌注后24 h、72 h,HSP47在脑组织中的表达水平均显著高于假手术组（P<0.000 1）。与模型组比较，丁苯酞组和Col003组MCAO大鼠的神经功能评分（P<0.05）和运动功能评分（P<0.01）均得到显著改善，脑梗死面积均显著减小（P<0.000 1），伊文思蓝渗透性均显著降低（P<0.000 1）。与模型组比较，Col003组大鼠脑组织中紧密连接蛋白的表达显著增高（P<0.01），间充质标志蛋白的表达显著降低（均P<0.01）。结论：Col003可改善脑缺血再灌注后BBB的损伤，具有保护BBB的作用，其对BBB的保护作用可能是通过抑制EndMT实现。

关键词

热休克蛋白47 / Col003 / 缺血性卒中 / 缺血再灌注损伤 / 血脑屏障 / 内皮—间质转化