沉香提取物通过调控NF-κB通路改善HaCaT细胞银屑病样炎症

摘要

目的：探讨沉香提取物（AE）对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的角质形成细胞（HaCaT）银屑病样炎症模型的影响及作用机制。方法：使用40 ng/mL的TNF-α诱导HaCaT细胞银屑病样炎症模型，后分别用16μg/mL（低浓度）、24μg/mL（中浓度）、32μg/mL（高浓度）AE干预。应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测HaCaT细胞活力，流式细胞术检测HaCaT细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测多种炎症介质、κB抑制蛋白α(IκBα) mRNA表达和分泌，蛋白质印迹（western blotting）实验检测NF-κB通路关键蛋白表达。结果：40 ng/mL TNF-α刺激后HaCaT细胞活力升高（P<0.01），早期细胞凋亡率和IκBα mRNA水平下降（P<0.05），白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17A(IL-17A)、TNF-α、趋化因子配体20(CCL20)mRNA水平和含量升高（P<0.05），磷酸化核因子-κB p65(p-p65)蛋白水平升高（P<0.01）。一定浓度AE干预后HaCaT细胞活力下降（P<0.01）；低、中、高浓度AE可升高TNF-α预处理的HaCaT早期细胞凋亡率和IκBα mRNA水平（P<0.01），降低IL-6、IL-1β、IL-17A、TNF-α、CCL20 mRNA表达和含量（P<0.05）及p-p65蛋白水平（P<0.01）。结论：AE可通过抑制NF-κB通路中p65蛋白磷酸化以降低HaCaT细胞银屑病样炎症模型中炎症因子和趋化因子释放，诱导细胞凋亡，改善炎症反应。

关键词

沉香提取物 / 银屑病 / HaCaT细胞 / NF-κB信号通路 / 炎症因子 / 凋亡