融合蛋白和密码子优化策略提高真菌漆酶在黑曲霉中的表达

摘要

试验通过融合蛋白和密码子优化策略提高2种真菌漆酶，即灵芝（Ganoderma Karst）漆酶和硬毛粗盖孔菌（Funalia trogii）漆酶在黑曲霉中的分泌表达量。通过对重组菌株进行蛋白水平、转录水平、菌体形态学检测，探究融合蛋白和密码子优化策略对漆酶表达的影响，旨在找出提高蛋白产量的有效策略，构建高效表达漆酶的黑曲霉重组菌株，为低表达蛋白在黑曲霉中的高效表达提供新思路。结果表明：通过融合蛋白策略，以黑曲霉内源高分泌蛋白XynB、FaeA作为载体蛋白，将硬毛粗盖孔菌漆酶的分泌表达量分别提高33.41倍、30.43倍，灵芝漆酶分泌表达量分别提高0.45倍、0.74倍。根据黑曲霉密码子使用偏好性对漆酶基因进行密码子优化，灵芝漆酶分泌表达量提高0.35倍，但硬毛粗盖孔菌漆酶分泌表达量显著降低。

关键词

硬毛粗盖孔菌漆酶 / 灵芝漆酶 / 黑曲霉 / 优化表达策略 / 高效分泌表达