利用细菌人工染色体构建人SIRPα转基因兔模型

摘要

异种细胞和组织移植是免疫缺陷动物主要研究方向之一，为增强免疫缺陷动物对人源细胞与组织的亲和性，降低免疫排斥反应，常通过转入人SIRPα(Signal regulatory proteinα)基因使其免疫细胞表达人源SIRPA蛋白。hSIRPA蛋白可识别并结合人源移植细胞上的CD47分子，形成“不要吃我”信号，抑制吞噬细胞吞噬，显著降低受体动物对外来细胞和组织的免疫排斥反应，提高其在动物体内的移植效果。研究通过显微操作技术将含有hSIRPα基因的BAC质粒注射到兔受精卵原核中，经胚胎移植成功获得h SIRPα转基因兔。通过PCR、real-time PCR、流式细胞术等方法检测转基因兔基因型与表型。结果表明：通过检测F0和F1两代hSIRPα转基因兔基因型，hSIRPα基因被完整地转入兔体内。在转基因各组织中hSIRPα基因表达水平存在差异，在回肠、胃、脾脏中，hSIRPα基因表达水平显著高于野生型兔；外周血流式细胞技术检测结果可知，hSIRPα在转基因兔的表达水平高于野生型，不影响兔免疫细胞及组分正常发育。综上，试验成功获得hSIRPα转基因兔，为获得类似于NSG、NOG小鼠的免疫缺陷兔模型奠定基础。

关键词

细菌人工染色体(BAC) / 转基因兔模型 / h SIRPα基因 / SIRPα-CD47抑制性信号