双峰驼诱导多能干细胞的鉴定及其体外分化为乳腺上皮细胞的泌乳功能

高坤; 马甜; 蒋娣娣; 刘婉若; 胡俊杰; 董伟韬; 赵兴绪; 张勇; 李宗帅

doi:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2025.06.011

东北农业大学学报 ›› 2025, Vol. 56 ›› Issue (06) : 111 -125. DOI: 10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2025.06.011

双峰驼诱导多能干细胞的鉴定及其体外分化为乳腺上皮细胞的泌乳功能

高坤, 马甜, 蒋娣娣, 刘婉若, 胡俊杰, 董伟韬, 赵兴绪, 张勇, 李宗帅

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

PDF

摘要

为探究双峰驼诱导多能干细胞(bciPSCs)分化为乳腺上皮细胞(MECs)的方法及bciPSC-MECs的泌乳功能，通过形态、免疫荧光等方法对bciPSCs进行多能性鉴定，设计4种诱导方案(M1、M2、M3和M4)将bciPSCs分化为MECs，筛选最佳诱导方案；通过对最佳方案的bciPSC-MECs进行传代，根据CSN2表达与否，采用转录组测序检测bciPSC-MECs第1代(F1)和第28代(F28)细胞中泌乳相关因子变化。结果表明：bciPSCs具有多能性；4种方案均诱导出bciPSC-MECs。其中，上皮完全培养基中添加胰岛素、醋酸普罗瑞林和雌二醇的优化培养基，可有效提高bciPSCs分化为MECs的效率。通过挖掘分析RNA-Seq数据，推测bciPSC-MECs泌乳功能丧失的潜在机制，是通过白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子β1(TGF-β1)的下调，降低MECs增殖和分化活性，抑制催乳素受体(PRLR)与催乳素(PRL)结合，导致CSN2合成抑制，最终关闭MECs泌乳功能。