肇东盐单胞菌(Halomonas zhaodongensis)中草酰乙酸脱羧酶(OadGAB)膜定位研究

邢梦莎; 孟琳; 姜巨全

doi:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2026.01.008

东北农业大学学报 ›› 2026, Vol. 57 ›› Issue (01) : 83 -91. DOI: 10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2026.01.008

肇东盐单胞菌(Halomonas zhaodongensis)中草酰乙酸脱羧酶(OadGAB)膜定位研究

邢梦莎, 孟琳, 姜巨全

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摘要

草酰乙酸脱羧酶（OadGAB）是具有初级钠离子泵活性的脱羧酶家族。通过氨基酸分析和跨膜螺旋预测得知，OadGAB含有3个亚基：α亚基（OadA）、β亚基（OadB）、γ亚基（OadG）。其中，OadA位于胞浆中，OadG和OadB位于膜上，但并无直接证据证明OadGAB的亚基组成和细胞定位；通过构建标签融合载体，转化到E.coil BL21*(DE3)感受态细胞中，诱导蛋白质表达，提取蛋白质组分后进行Western blot细胞定位试验。结果表明：OadA位于胞浆中，OadG位于细胞膜上，OadB未发现阳性信号。为证明OadGAB可正常表达，将融合载体转化到盐敏感缺陷株E.coil KNabc中，测定耐盐生理。结果发现，融合后的载体仍可使KNabc恢复生长。在此基础上，推测OadB的C端包裹在蛋白质内部，无法与标签抗体结合。这一结果为草酰乙酸脱羧酶家族的结构研究提供新的理论依据，对微生物耐盐机制研究具有重大意义。