新型Na⁺/H⁺逆向转运蛋白RDD的α2螺旋K101残基突变

摘要

RDD蛋白是一类至少以同源二聚体形式存在，并以寡聚体行使功能的新型Na⁺（Li⁺,K⁺）/H⁺逆向转运蛋白，属于RDD家族，具有转运Na⁺、Li⁺和K⁺的功能。为鉴定RDD蛋白α2螺旋中高度保守的氨基酸残基K101是否在RDD寡聚化及转运功能维持中发挥重要作用，通过氨基酸定点突变将101位赖氨酸（K101）突变成丙氨酸（A），利用荧光共振能量转移（FRET）技术、耐盐生理测试和蛋白质活性检测进行详细探究。结果表明：突变后的RDD并未发生FRET，说明K101并不影响RDD寡聚体形成；但相比于野生型RDD，突变后的RDD Na⁺/H⁺逆向转运活性下降25.70%，证明K101是间接影响Na⁺/H⁺逆向转运功能的残基。

关键词

RDD / 同源寡聚体 / Na⁺/H⁺逆向转运 / 定点突变