表达抗IBDV-VP2全长抗体工程细胞株的筛选及其阻断病毒的作用

摘要

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病毒（IBDV）引起的一种急性、高度接触性传染病，主要侵害3～6周龄雏鸡的中枢免疫器官法氏囊，造成严重免疫抑制。利用基因工程技术构建含有鸡源抗IBDV-VP2蛋白抗体的重链（H）和轻链（L）基因的真核表达载体pEE-L-IRES-EGFP-H-8（1）和pEE-L-IRES-EGFP-H-Y8，通过脂质体转染将该真核表达载体转入CHO-K1细胞中，使用流式细胞分选术（FCS），筛选出高表达单克隆细胞株。ELISA和Western blotting的结果证明，2种单克隆细胞株所表达的全长抗体均可特异性结合IBDV VP2L蛋白。细胞中和试验表明，细胞株8（1）和细胞株Y8均具有抑制病毒对鸡胚成纤维细胞产生损伤的能力，且最低有效抑制浓度分别为0.05和0.10 nmol·L^-1；在胚胎水平上，8（1）全长抗体的最高保护率达100%，可完全阻断IBDV B87对鸡胚的感染；Y8全长抗体的最高保护率达80%。研究开发的鸡源抗IBDV全长抗体，不仅为IBD治疗提供新型候选药物，也为其他治疗性抗体的研发提供参考。

关键词

鸡传染性法氏囊病 / 全长抗体 / CHO工程细胞株 / 阻断病毒感染

基金资助

黑龙江省科技创新基地奖励项目（JD24B009）