抗小鹅瘟病毒截短型IgY抗体表达及其中和活性检测

刘培静; 杜鑫; 李慧敏; 孙文影; 郭笑辰; 曹巍月; 韩嘉驰; 王敬鸣; 任桂萍

doi:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2026.02.008

东北农业大学学报 ›› 2026, Vol. 57 ›› Issue (02) : 1 -11. DOI: 10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2026.02.008

抗小鹅瘟病毒截短型IgY抗体表达及其中和活性检测

刘培静, 杜鑫, 李慧敏, 孙文影, 郭笑辰, 曹巍月, 韩嘉驰, 王敬鸣, 任桂萍

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

PDF

摘要

为获得针对小鹅瘟（GP）的本动物源治疗性工程抗体，将试验室制备的pET27b-tHC₁₀、p ET27btHC₁₁、p ET27b-L 3种表达载体，经大肠杆菌表达系统包涵体表达，获得1种轻链蛋白和2种截短型重链蛋白，将截短型重链和轻链按照3.2质量比稀释复性，获得截短型抗体IgY（ΔFc）-10和IgY（ΔFc）-11。蛋白质印迹法和ELISA结果表明：2种IgY（ΔFc）均可特异性结合小鹅瘟病毒（GPV）VP₂蛋白和完整GPV颗粒。细胞水平阻断试验结果表明：IgY（ΔFc）-10和IgY（ΔFc）-11最低有效抑制质量浓度分别为10、5 mg·L^-1。在鹅胚攻毒保护试验中，以100 ELD₅₀(每0.2 m L的EID₅₀为10^-4.625)的GPV攻击时，100μg的IgY（ΔFc）-10和IgY（ΔFc）-11对鹅胚的攻毒保护率分别为40%、60%，且存活胚胎的生长发育状态与生理盐水对照组无差异。此外，通过建立基于实时荧光定量PCR的GPV中和活性评价体系，确定C_t=22.12为细胞病变临界值，为抗体中和活性评估提供新方法。可知，截短型IgY抗体可有效阻断GPV感染，为小鹅瘟治疗性抗体开发奠定基础。