(R)-兰索拉唑不对称合成中Baeyer-Villiger单加氧酶的筛选

摘要

目的 挖掘新的(R)-兰索拉唑不对称合成中的Baeyer-Villiger单加氧酶(BVMO)。方法 在基因组数据库中挖掘、筛选得到6种候选BVMOs,将候选酶克隆至表达载体pET-28a(+)中，转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),筛选最佳诱导条件，获得可溶性蛋白。利用候选酶不对称催化合成(R)-兰索拉唑。结果 挖掘得到的6种新酶中，PlBVMO、CSKBVMO、AbBVMO能够完成从底物兰索拉唑硫醚到(R)-兰索拉唑的不对称合成，其中，PlBVMO的收率达12.8%,对映体过量百分数(ee)>99%。结论 挖掘、筛选新的BVMOs可为(R)-兰索拉唑类药物的生物合成提供新的方法与路线。

关键词

(R)-兰索拉唑 / Baeyer-Villiger单加氧酶 / 基因挖掘 / 蛋白表达 / 蛋白电泳 / 酶催化 / 不对称合成 / 大肠杆菌 / 质子泵抑制剂