加味过敏煎对特应性皮炎小鼠皮肤M2a巨噬细胞的影响

摘要

目的 观察加味过敏煎对特应性皮炎（AD）小鼠皮损及行为学的影响，从巨噬细胞极化角度分析其机制。方法 用2,4-二硝基氟苯诱导建立AD小鼠模型，将50只BALB/c小鼠随机均分为对照组、模型组、过敏煎(10.27 g·kg^-1)组、加味过敏煎(14.39 g·kg^-1)组、富马酸酮替芬(0.33 mg·kg^-1)组；自造模第8天开始，过敏煎组、加味过敏煎组和富马酸酮替芬组ig给予相应药物，其余各组ig给予等量生理盐水。观察各组小鼠的皮损情况和搔抓反应；苏木素-伊红染色观察小鼠皮肤组织的病理形态学改变；甲苯胺蓝染色观察小鼠皮肤组织中肥大细胞脱颗粒的状态；免疫荧光检测小鼠皮肤组织中精氨酸酶1（ARG1）的表达水平；蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小鼠皮损中白介素（IL）-4、IL-13、转化生长因子（TGF）-β、IL-10、ARG1、IL-1Rα蛋白与mRNA的表达水平。结果 与对照组比较，模型组小鼠搔抓次数显著增加，表皮明显增厚，真皮层水肿及坏死区伴大量炎性细胞浸润，肥大细胞脱颗粒明显增多，ARG1荧光强度增加，IL-4、IL-13、ARG1、TGF-β、IL-10、IL-1Rα的表达水平均明显升高。与模型组比较，各给药组小鼠皮损明显减轻，搔抓次数明显减少；肥大细胞脱颗粒数量不同程度减少，其中，加味过敏煎组抑制小鼠肥大细胞脱颗粒最明显；皮肤M2a巨噬细胞特异性蛋白ARG1的表达减少；皮肤M2a巨噬细胞分泌的炎性因子IL-4、IL-13、TGF-β的表达均降低。结论 加味过敏煎具明显改善AD小鼠皮损和瘙痒的作用，其机制可能与减少皮肤肥大细胞脱颗粒炎性因子的释放，抑制巨噬细胞向M2a型极化相关。

关键词

加味过敏煎 / 特应性皮炎 / 以皮治皮 / 肥大细胞 / 巨噬细胞 / 调控 / 炎症 / 瘙痒